雜交瘤細胞株；4G1圖片

雜交瘤細胞株；4G1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞株；4G1圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

核酸內切酶 V    250U    
二硫蘇糖醇 (DTT)    5g    
十二烷基磺酸清除劑    25mL    
CAS108321-42-2    遺傳    100mg
100602-250    干粉型 LB 培養(yǎng)基    250g
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)    30 次    
間充質干細胞脂防細胞分化生長因子    5mL    
β- 乙醇    100mL    
魯米諾    1g    
CAS7220-79-3    次(亞)甲基蘭    10g
120705-5    L- 谷胱甘肽 ( 還原型 )    5g
支鏈淀粉    1g    
苦杏仁苷    1g    
磷酸二氫    250g    
EHA105 農桿菌感受態(tài)細胞    10×100μL    
CAS50-69-1    D- 核糖    5g
131052-10    β- 乙醇，蛋白    10mL
柱式土壤 RNAout    50 次    
磷酸二酯酶Ⅱ    10U    
CN/DAB 底物套裝     1套 Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
CW-2(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱：3T3A31
A875/黑色素瘤細胞株國產
胎兒真成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生化試驗鑒別250克國產/進口
人神經小膠質細胞*培養(yǎng)基100mL
ONPG發(fā)酵管BR20支國產/進口
人甲狀腺濾泡上細胞*培養(yǎng)基100mL
改良Frey氏培養(yǎng)基基礎/Frey Medium Modified Base250克國產/進口
黑色素瘤英文名稱：B16瘤
真菌培養(yǎng)基/霉菌培養(yǎng)基/Mould Medium用于無菌試驗及真菌培養(yǎng)250克國產/進口
CaES-17(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
高分化鼻咽細胞英文名稱：CNE-1
SK-MES-1(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎/卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎/Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)250克國產/進口
肺鱗英文名稱：NCI-H520
明膠蛋白胨/蛋白胨E/Gelatin PeptoneBR250克國產/進口