詳細介紹
雜交瘤細胞株;YD8圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;YD8圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Phospho-Beta-Catenin (Ser552) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
IFI78/MX1 干擾素誘導蛋白P78抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-PDK1(Ser241) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1規(guī)格: 0.1ml
phospho-ATXN1(Ser775) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
IFNA16/Interferon alpha 16 干擾素α16抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體規(guī)格: 0.1ml
OTOA/DFNB22 耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體規(guī)格: 0.2ml
ASAH2 酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
MMP-13 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體規(guī)格: 0.1ml
C3orf21/XXYLT1 3號染色體開放閱讀框21抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體 0.1ml
LH 促黃體生成素抗體規(guī)格: 0.1ml
GLTPD2 糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構域2抗體規(guī)格: 0.2mlQGY-7703(人肝細胞)5×106cells/瓶×2gersion
Calu-6(人肺退行性細胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠腎小管上細胞gersion
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2
Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2
ES-2(人卵巢透明細胞細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腎小管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
BABL/C小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:BABL/3T3
小鼠表角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基100mL
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基/0.5% Dextrose Broth Medium環(huán)氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程檢測指示菌(枯草桿菌黑色變種芽孢及短小桿菌芽孢)培養(yǎng)(GB標準)250克國產(chǎn)/進口
人視網(wǎng)膜色素上細胞*培養(yǎng)基100mL
M-FC肉湯/濾膜糞大腸菌肉湯/M-FC Broth大腸桿菌群的濾膜法檢測250克國產(chǎn)/進口
人淋巴內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
大腸菌群顯色培養(yǎng)基配套平皿/Coliform Chromogenic Medium Dish9㎝/塊國產(chǎn)/進口
麥角甾苷規(guī)格:1g/支;98%
酪胨瓊脂/Peptone From Casein Agar藥品、生物制品無菌試驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
UACC-812(人腺導管瘤細胞)5×106cells/瓶×2
乙酰胺酚紅瓊脂/Acetamide Agar250克國產(chǎn)/進口
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE PE標記的鼠抗人IgG單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml
CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構域蛋白114抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat anti-human IgG whole serum 羊抗人IgG抗血清規(guī)格: 1ml
ECP 嗜酸性粒細胞陽離子蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml