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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株；9H3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；9H3圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
CK16 細(xì)胞角蛋白16抗體規(guī)格: 0.1ml
Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37 肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體規(guī)格: 0.1ml
Cecropin 抗菌肽/天蠶素抗體規(guī)格: 0.2ml
DOCK1 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
STK36 絲氨酸/蘇氨酸激酶36融合同源蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
XAGE2 瘤/睪抗原12家族2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rho C RhoC抗體規(guī)格: 0.1ml
CHMP1A 染色質(zhì)修飾蛋白1A抗體規(guī)格: 0.2ml
Septin 8 細(xì)胞分化蛋白SEPT8抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體規(guī)格: 0.1ml
CCR9 細(xì)胞表面趨化因子受體9抗體規(guī)格: 0.1ml
JAKMIP2/NECC1 JAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）規(guī)格: 0.2ml
PPIG 親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體規(guī)格: 0.2ml
Caspase 4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體規(guī)格: 0.1mlABI 高通量 DNA 測(cè)序 1次 D009-1
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 50 次 91106A-50
10g 維生素 B1
20 次 克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液
10mL 弗氏*佐劑
5mL 肝細(xì)胞生長因子
100g DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD） 20 次 140631-20
Southern Marker Oligo( 生物素 ) 20 次 120654E-20
10mL 石蠟油，PCR
25 次 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒
1g 羥基脲
25mg 嗜熱菌蛋白酶
硫酸鎂七水 100g CAS10034-99-8
胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL 1mL 100835-1
50 次 柱式凝固血液 DNAout
100g 馬來酸
1mL ATP 溶液，1mM
10mL DNA 上樣液 ( 紅 ),6×
1mL JM83 菌種
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