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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株；5G2價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
雜交瘤細(xì)胞株；5G2價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
RNF133 環(huán)指蛋白133抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml
HLA-DR HLA-DR抗體規(guī)格: 0.2ml
RNF15 環(huán)指蛋白15抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
HER3/ErbB3 HER3受體抗體規(guī)格: 0.2ml
FAM135B FAM135B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml
GST tag/GSTM1 GST標(biāo)簽蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
KCTD12 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.3ml
GLUT1 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調(diào)節(jié)素抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
NARG2 谷氨酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgM規(guī)格: 0.1ml25g 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒
10mL 鈷柱介質(zhì)
硫酸慶大 500mg CAS1405-41-0
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動(dòng)子 ) 200mL 100825-200
10 次 一站式生物素 TUNEL 試劑盒 (FITC/POD)
500U 堿性磷酸酶，牛小腸
25g 琥珀酸，六水
60μL 驢抗山羊 IgG，堿性磷酸酶標(biāo)記
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 25g CAS617-04-9
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗 100μL 130574-100
48 T 脂褐質(zhì)測(cè)試盒
2mg L- 氨基酸氧化酶
25g 卵磷脂 ( 大豆 )
10×100μL Y187 酵母感受態(tài)細(xì)胞
水楊酸 25g CAS69-72-7
咪唑溶液，2M 100mL 131222-100
50 次 柱式細(xì)菌 RNAout
1mg 磷脂酶 A2
25g 玉米蛋白
1000 支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝 )
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