詳細介紹
抗H9亞型禽流感病毒HA蛋白小鼠雜交瘤細胞株;S1B1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
抗H9亞型禽流感病毒HA蛋白小鼠雜交瘤細胞株;S1B1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Lipin 1 磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗體規(guī)格: 0.2ml
SLC37A4/G6PT2 葡萄糖-6磷酸轉運蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
CDK6 周期素依賴性激酶6抗體規(guī)格: 0.1ml
BMP11 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體規(guī)格: 0.2ml
SYP p38/Synaptophysin/SAP-1 突觸素抗體/突觸相關蛋白-1規(guī)格: 0.1ml
CD54/ICAM-1 細胞間粘附分子-1抗體規(guī)格: 0.1ml
WT-1/Wilms Tumor Protein 腎母細胞瘤蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Pan-ras Pan ras抗體規(guī)格: 0.1ml
CD226/DNAM-1 CD226抗體規(guī)格: 0.1ml
Rffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189抗體規(guī)格: 0.2ml
presenilin 1/PS-1 (NT) 早老素蛋白-1抗體規(guī)格: 0.1ml
CCL4/MIP-1 Beta 巨噬細胞炎性蛋白1β抗體規(guī)格: 0.1ml
MST4 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MST4抗體規(guī)格: 0.2ml
PLGF/PIGF (human) 胎盤生相關抗體(人)規(guī)格: 0.1ml
Calpain 1 鈣蛋白酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
SCN1B 鈉離子通道β1抗體規(guī)格: 0.1ml
PFKFB2 果糖-2,6-二磷酸酶心肌酶抗體規(guī)格: 0.2ml
BMI-1/PCGF4 組蛋白相關Bmi1抗體規(guī)格: 0.2mlAEBSF 溶液,10mg/mL 5mL 130544-5
50 次 柱式糞便 DNAout
25 次 miRNA 熒光定量檢測試劑盒
100mg AMPPD
2 μg Cre/Lox 系統(tǒng)載體系列
5次 超快核酸轉膜試劑盒
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 ) 25 T 18-0630-25
溴化乙錠溶液 ,10 mg/mL 1.5mL 3180-1.5
100 次 神經氨酸酶抑制劑篩選試劑盒
30 次 DNA 快速連接試劑盒
500 次 超敏型 BCA 法蛋白定量試劑盒
5mL 藍膠瓊脂糖
尿嘧啶 -DNA 糖基化酶 500U 130646-500
Aminoally-dUTP 溶液,10mM 100μL 120631-100
10×100μL TB1 感受態(tài)細胞
10mg 碘化丙啶干粉
100mL 胰酶消化液 ( 無 EDTA)
200 次 熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒
親和素 10mg 131085-10
DNA Shuffling 試劑盒 10 次 131178-10
100 μL 兔抗山羊 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記
5g 番紅 O
250mL 重蒸酚
1mL Protein A 磁珠