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中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-價格

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  • 品牌 ATCC
  • 廠商性質 經銷商
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更新時間:2017-01-23 08:50:59瀏覽次數(shù):278

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞為二氫葉酸還原酶缺陷型。 
培養(yǎng)條件   10%FBS
傳代方法  1:4-1:8,每周換液2-3次
傳代情況 PN2
凍存條件  90%FBS+10%DMSO
支原體檢測 
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

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HEMCL-006    293 Ad5    人原胚腎轉化細胞    1×106    1ml/T75    1500 元TMB 法地高雜交試劑盒    130999-5    5次
250U    Tth DNA 聚合酶    
100mL    杜氏 PBS 緩沖液 ,10×    
5次    PCR 法 DNA 探針標記試劑盒    
10,000 milli U    三磷酸苷雙磷酸酶    
微生物種屬鑒定及分型    D012-1    1次
SP6 體外轉錄試劑盒    91107B-50    50 次
48 T    維生素 C 測試盒    
25g    氟化    
10g    β- 甘油磷酸二鹽    
100mL    酵母及產孢培養(yǎng)基    
羅丹明 B    CAS81-88-9    10g
α-Tubulin 小鼠單抗    130568-1000    1000μL
RNA 溶解液    130505-10    10mL
1盒    PAGE 膠長加樣槍頭    
1g    CHAPS    
50 次    DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)    
2mL    硅基磁珠    
microRNA 熒光定量 PCR 檢測技術服務    D022-1    樣/基因
BL21(DE3)pLysS 化學感受態(tài)細胞    90507-10    0.1mL×10
1000μL    小鼠抗 MBP 標簽單抗    
50 次    加 A 試劑盒    

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