人APP-PS1（M146L）雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書 返回列表頁

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書
形態(tài)特性  多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  將突變型PS1（M146L）基因轉(zhuǎn)染至表達APP基因的CHO細胞所得，該細胞分泌的Aβ是野生型PS-1或APP轉(zhuǎn)染細胞的5~6倍。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  
使用權(quán)限 A類

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

WHB-M1-W    WHB 口罩    白色口罩(三層帶過濾紙)    無紡布    50個/包,2000只/箱    詢價 元
HUM- iCell -b003    心肌成纖維細胞    1×106    3642 元    5×106    6724 元
HUM- iCell -n002    神經(jīng)元細胞    1×106    3874 元    5×106    7258 元
HUM- iCell -u013    前列腺上皮細胞    1×106    3596 元    5×106    6987 元
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HGCL-019    HeLa-GFP    人子宮頸癌細胞（GFP基因修飾）    1×106    1ml/T75    1500 元
HIMCL-051    MOLT-4    人急性淋巴母細胞性白血病細胞    1×106    1ml/T75    1000 元
HRCL-017    DMS153    人小細胞肺癌細胞    1×106    1ml/T75    1500 元
ICL-008    SSC-S1    家豬皮膚細胞    1×106    1ml/T75    1500 元
IMCL-005    CGM1    人EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞    1×106    1ml/T75    1500 元
MNCL-005    GT1-1    小鼠垂體瘤細胞    1×106    1ml/T75    1500 元
RECL-003    PC-12    大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（高分化）    1×106    1ml/T75    450 元
點擊    人心肌成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒    人心肌成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒    試劑盒    試劑盒    元
點擊    人膽道癌組織源細胞培養(yǎng)試劑盒    人膽道癌組織源細胞培養(yǎng)試劑盒    試劑盒    試劑盒    元印跡膜抗體稀釋液    81208-100    100mL
30μg    φX174RF Ⅱ DNA    
40 次    miRNA PAGE 膠回收試劑盒    
1000 支    10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯長尖 )    
24 T    總抗氧化能力測試盒 ( 比色法 )    
1mL    胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL    
Zenker 固定液    131223-250    250 mL
固相 RNase 清除劑    3090-100    100mL
100g    牛膽粉    
1600 次    AFLP 試劑盒 (EcoRI-MseI)    
1mg    MM4-64(FM®4-64)    
1套    玻璃勻漿器 ,1mL    
NAO     22-0510-25    25mg
動物 DNAout    3670-100    100mL
3 mL    親和層析柱    
1套    玻璃勻漿器 ,5mL    
1.5mL    液相 RNase 清除劑    
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株；7WML6.0說明書20 次    即用型藍白 T 載體 C 型 (T7-T3，無 MCS)    
小鼠胰島細胞分離液 1.072    120911-200    200mL
柱式質(zhì)粒 DNAout    60205-50    50 次
100μg    人基因組 DNA 混合液    
10g    D- 阿拉伯糖    
50 次    柱式細 DNAout