中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克?。?；CHO-HCV-E2價格

中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克?。?；CHO-HCV-E2價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-E2價格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  CHO-HCV-E2細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因，能穩(wěn)定表達(dá)E2蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士構(gòu)建于2008年并保存。 
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

 桂皮醛    分子式：    132.16    分子量：    C9H8O    英文名稱：    Cinnamaldehyde    CAS號：    14371-10-9    
 左旋千金藤啶堿    分子式：    327.37434    分子量：    C19H21NO4    英文名稱：    L-stepholidine    CAS號：    16562-13-3    
 Hanks’ Balanced Salts    分子式：        分子量：        英文名稱：    Hanks equilibrium salt    CAS號：    N#A2968    
 酸性藍(lán)    分子式：    566.66    分子量：     C27H31N2NaO6S2    英文名稱：    Acid blue    CAS號：    116-95-0    
 氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）    分子式：    817.6    分子量：     C40H30N10O6 · 2    英文名稱：    Nitro blue tetrazolium chloride (NBT)    CAS號：    298-83-9    
 溴酚藍(lán)    分子式：    669.96    分子量：     C19H10Br4O5S    英文名稱：    Bromine phenol blue    CAS號：    115-39-9    
 1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL    分子式：    188.27    分子量：     C13H16O    英文名稱：    1,1-DICYCLOPROPYLBENZENEMETHANOL    CAS號：    5689-19-0    
頭孢拉定    分子式：    349.41    分子量：     C16H19N3O4S    英文名稱：    Setting of the    CAS號：    38821-53-3    
 硫化劑HVA-2（PDM）    分子式：    268.23    分子量：     C14H8N2O4    英文名稱：    HVA-2 (PDM)    CAS號：    3006-93-7    
 亞硝基紅鹽    分子式：    377.26    分子量：     C10H5NNa2O8S2；ONC1    英文名稱：    Nitroso R salt    CAS號：    525-05-3    
 茜素    分子式：    240.21    分子量：     C14H8O4    英文名稱：    Alizarin    CAS號：    72-48-0    一站式植物 mRNAout    81028-25    25 次
10mL    鎳柱介質(zhì)    
100μL    Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制劑 )    
10mg    Hydroxystilbamidine     
30 次    通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒    
JC-1    22-0410-1    1mg
土壤腐殖酸清除劑    70603-100    100mL
120mL    氣相 RNase 清除劑    
150mL    丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR    
100mL    動物 RNAout(TRIzol)     
500U    Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶    
人內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.060    120901-200    200mL
柱式病毒 DNAout    70701-50    50 次
200μL    ROX 參考染料    
250mg    赤    
100mL    RNase-free  ,3M,pH 5.2    
200mL    人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 )     
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )    18-0330-250    250 T
TAE 電泳液 ,50×    100211-250    250mL
5g    傘形酮    
100mL    DNA  CTAB 溶液，20%    
50 次    柱式 OLIGO 回收試劑盒    
1mL    Rosetta-gami B(DE3)plysS 種    
WarmStart Bst DNA 聚合酶    131162-1600    1600U
電泳過硫酸銨    100879-1    0.1gx10