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倉鼠腎細(xì)胞;HL-1說明書

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更新時間:2017-01-23 14:14:29瀏覽次數(shù):574

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產(chǎn)品簡介

倉鼠腎細(xì)胞;HL-1說明書售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

倉鼠腎細(xì)胞;HL-1說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱 倉鼠腎細(xì)胞;HL-1說明書
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

 龍血素B    分子式:    316.35    分子量:    C18H20O5    英文名稱:    Loureirin B    CAS號:    119425-90-0    
 高烏甲素    分子式:    584.71    分子量:    C32H44N2O8    英文名稱:    Gao Wu    CAS號:    32854-75-4    
 二氫石蒜堿    分子式:    289.32636    分子量:    C16H19NO4    英文名稱:    Two Shi Suanjian    CAS號:    6271-21-2    
 扁蓄苷    分子式:    434.35032    分子量:    C20H18O11    英文名稱:    Avicularin    CAS號:    22255-13-6    
 活性艷藍KN-R    分子式:    626.54    分子量:     C22H16N2Na2O11S3    英文名稱:    Reactive brilliant blue KN-R    CAS號:    2580-78-1    
 吖啶紅    分子式:    274.75    分子量:     C15H15ClN2O    英文名稱:    Ya Dinghong    CAS號:    2465-29-4    
 酸性ATT    分子式:        分子量:        英文名稱:    Acid black ATT    CAS號:        
 Dichloro[8-(di-tert-butylphosphinooxy)quinoline]palladium(II)      分子式:        分子量:        英文名稱:    Dichloro[8- (di-tert-butylphosphinooxy) quinoline]palladium (II)    CAS號:    1100332-45-3    
 鹽酸溴己新    分子式:    412.59    分子量:     C14H21Br2ClN2    英文名稱:    Hydrochloric acid bromide    CAS號:    611-75-6    
 鈀碳觸媒    分子式:        分子量:        英文名稱:    Palladium carbon catalyst    CAS號:        
 二苯胺磺酸鈉    分子式:    271.27    分子量:     C12H10NNaO3S    英文名稱:    Two aniline sulfonic acid sodium    CAS號:    6152-67-6    
 天青I    分子式:    305.83    分子量:     C15H16ClN3S    英文名稱:    Azure I    CAS號:    531-55-5  
1000U    Mlu    
200U    AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶    
2500U    RNase 抑制劑 ( 人源 )    
5次    天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    
GpC 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.CviPI)    130653-200    200U
cDNA *鏈合成試劑盒    60906-50    50 次
1000 μL    VDAC1 小鼠單抗    
100mL    非凍型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 )     
25g    葡聚糖凝膠 G-15    
10mg    Hoechst33342 干粉    
L- 天門冬氨酸    CAS56-84-8    25g
lambda(λ)DNA    90407A-5    5μg
10 次    小 RNA 克隆試劑盒    
1套    硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )    
250g    聚乙二醇 6000    
25μL    Cy3-dCTP 溶液,10mM    
3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸    CAS59-92-7    5g
SURE 種    12-255    1mL
50 次    一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout    
1g    姬姆色素染料    
5g    固藍 BB 鹽    
100mg    辣根過氧化物酶,偶聯(lián)    
吲哚 -3- 丁酸    CAS133-32-4    1g
RIPA 裂解液 ( 強 )    131006-100    100mL 

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