中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1（亞系克隆）；CHO-K1說明書

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1（亞系克隆）；CHO-K1說明書售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  1957年，Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞，CHO-K1是CHO的一個(gè)亞克隆。CHO-K1的生長需要脯氨酸。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  20-26
使用權(quán)限 A類

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

100mg    堿性磷酸酶標(biāo)記親和素    
100g    檸檬酸，二水    
1000μL    山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記    
肌球蛋白    CAS100684-32-0    100mg
小鼠抗 c-Myc 標(biāo)簽單抗    130575-100    100μL
250mg    直鏈淀粉    
10g    L- 苯丙氨酸    
250g    麥芽浸粉    
10×100μL    T1 感受態(tài)細(xì)胞    
丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR    CAS65546-95-4    150mL
亞氨二介質(zhì)    131059-10    10mL
50 次    柱式血清血漿 RNAout    
25g    硫柳汞    
100g    瓊脂糖    
1000 支    1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝帶芯 )    
兔肌動蛋白    CAS51005-14-2    1mg
組蛋白 3.1 小鼠單抗    130571-1000    1000μL
非凍型血液 RNA 保存液    111202-100    100mL
1 g    糜蛋白酶原    
5g    3- 苯甲酰丙酸    
5mL    滑膜細(xì)胞生長因子    
100mg    5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)    
人基因組 DNA 混合液    131034-100    100μg
分子雜交爐    120930-1    1臺
 直接紅81    分子式：    675.6    分子量：     C29H19N5Na2O8S2    英文名稱：    Direct red 81    CAS號：    2610/11/9    
 日落黃    分子式：    452.37    分子量：     C16H10N2Na2O7S2    英文名稱：    Sunset yellow    CAS號：    2783-94-0    
 酸性嫩黃G    分子式：    380.35    分子量：     C16H13N4NaO4S    英文名稱：    Acid yellow G    CAS號：    6359-82-6    
 (3-BroMophenyl)(2,4,6-triMethylphenyl)iodoniuM triflate    分子式：    551.2    分子量：     C16H15BrF3IO3S    英文名稱：    (3-BroMophenyl) (2,4,6-triMethylphenyl) triflate iodoniuM    CAS號：    1203709-76-5    
 4-(3-三氟甲基)哌啶鹽酸鹽    分子式：    265.7    分子量：     C12H15ClF3N    英文名稱：    4- (3- three trifluoromethyl phenyl) piperidine hydrochloride    CAS號：    6652-16-0    
 L-纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽    分子式：    173.25    分子量：     C9H19NO2    英文名稱：    L- l-norvaline tert butyl ester hydrochloride    CAS號：    13211-31-9    
 溴百里香酚蘭    分子式：    624.38    分子量：     C27H28Br2O5S    英文名稱：    Bromothymol blue    CAS號：    76-59-5    
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)；CHO-K1說明書蘇丹Ⅳ    分子式：    380.44    分子量：     C24H20N4O    英文名稱：    Su Dan    CAS號：    85-83-6    
 酸性紫7    分子式：    566.47    分子量：     C20H16N4Na2O9S2    英文名稱：    Acid violet 7    CAS號：    4321-69-1    
 氯酚紅    分子式：    423.27    分子量：     C19H12Cl2O5S    英文名稱：    Chlorophenol red    CAS號：    4430-20-0