詳細(xì)介紹
狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;DH82價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;DH82價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 巨噬細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 DH82細(xì)胞具有類似巨噬細(xì)胞形態(tài),并能吞噬乳膠顆粒。 細(xì)胞具有Fc gamma受體陽(yáng)性,F(xiàn)c mu和C3b受體陰性。 細(xì)胞不生成IL-1。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
芐嘧磺隆 分子式: 410.4 分子量: C16H18N4O7S 英文名稱: Bensulfuron methyl CAS號(hào): 83055-99-6
(S,S,S)-2-氮雜雙環(huán)[3,3,0]辛烷-3-羧酸芐酯鹽酸鹽 分子式: 281.78 分子量: C15H20ClNO2 英文名稱: (S, S, S) -2- azabicyclo [3,3,0] octane -3- carboxylic acid benzyl ester hydrochloride CAS號(hào): 93779-31-8
溴磷松 分子式: 366 分子量: C8H8BrCl2O3PS 英文名稱: Bromine and phosphorus CAS號(hào): 2104-96-3
豬去氧膽酸 分子式: 392.57 分子量: C24H40O4 英文名稱: Hyodeoxycholic Acid CAS號(hào): 83-49-8
鹽酸育亨賓 分子式: 390.90368 分子量: C21H27ClN2O3 英文名稱: Yohimbine hydrochloride CAS號(hào): 65-19-0
五味子醇甲 分子式: 416.46422 分子量: C23H28O7 英文名稱: The fruit of Fructus CAS號(hào): 58546-54-6
人參皂苷Rd 分子式: 947.15388 分子量: C48H82O18 英文名稱: Ginsenoside Rd CAS號(hào): 52705-93-8
牡荊素 分子式: 432.38 分子量: C21H20O10 英文名稱: Vitexin CAS號(hào): 3681-93-4
巴馬汀 分子式: 352.4 分子量: C21H22NO4+ 英文名稱: Martin CAS號(hào): 3486-67-7
番茄汁 分子式: 862.74 分子量: C42H38O20 英文名稱: Tomato Juice CAS號(hào): 81-27-6 96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 ) 80919-5 5次
10 次 水樣病毒沉淀劑
200mL 大鼠瘤細(xì)胞分離液 1.061
25 次 一站式植物 mRNAout
10mL E-64 蛋白酶抑制劑,20mg/mL
Mlu 17-0110 1000U
AP 標(biāo)記的抗生物素抗體 131002-10 10μL
0.1mL×10 Tuner(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞
20 次 多點(diǎn)突變?cè)噭┖?nbsp;
50 次 柱式 BAC DNAout
500μg T4 噬體基因 32 蛋白
RNA 提取技術(shù)服務(wù) R001-1 1 個(gè)樣
G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 130697-25 25 OD
24 T 胃蛋白酶測(cè)試盒
1000μL GAPDH 小鼠單抗
25g 十二烷基肌氨酸
1mL 鯡魚精 DNA 溶液
洋紅 CAS1390-65-4 1g
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞 140430-10 0.1 mL×10
1000μL 小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗
20μL HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-Tubulin)