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詳細(xì)介紹
犬胸腺細(xì)胞；cf2Th說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 犬胸腺細(xì)胞；cf2Th說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性
生長(zhǎng)特性 貼壁
特征特性 該細(xì)胞為幾種逆轉(zhuǎn)錄病毒的敏感株，可用于擴(kuò)增逆轉(zhuǎn)錄病毒。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:2-1:6，每周換液2-3次
傳代情況
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
1,4-丁內(nèi)酯 分子式： 86.09 分子量： C4H6O2 英文名稱： 1,4- butyl ester CAS號(hào)： 96-48-0
1,2-二乙氧基乙烷 分子式： 118.17 分子量： C6H14O2 英文名稱： 1,2- two ethylene oxide CAS號(hào)： 629-14-1
二氯酞菁硅 分子式： 611.52 分子量： C32H16Cl2N8Si 英文名稱： Two chloride CAS號(hào)： 19333-10-9
藥根堿 分子式： 338.38 分子量： C20H20NO4 英文名稱： Drug base CAS號(hào)： 3621-38-3
吡嘧磺隆 分子式： 414.39 分子量： C14H18N6O7S 英文名稱： Pyrazosulfuron CAS號(hào)： 93697-74-6
氟替卡松 分子式： 500.57 分子量： C25H31F3O5S 英文名稱： Fluticasone CAS號(hào)： 90566-53-3
密滅汀A4 分子式： 542.7 分子量： C32H46O7 英文名稱： Mi A4 CAS號(hào)： 51596-11-3
梓醇 分子式： 362.33 分子量： C15H22O10 英文名稱： Catalpol CAS號(hào)： 2415-24-9
鹽酸依立替康 分子式： 623.15 分子量： C33H38N4O6.HCl 英文名稱： Hydrochloric acid in accordance with CAS號(hào)： 100286-90-6
五味子丙素 分子式： 384.428 分子量： C22H24O6 英文名稱： The C CAS號(hào)： 61301-33-5
人參皂甙Rc 分子式： 1079.2685 分子量： C53H90O22 英文名稱： Ginsenoside Rc CAS號(hào)： 11021-14-0
D(+)-五水棉子糖 分子式： 594.51 分子量： C18H42O21 英文名稱： D (+) - raffinose five water CAS號(hào)： 17629-30-0
黃芩素 分子式： 270.24 分子量： C15H10O5 英文名稱： Huang Qinsu CAS號(hào)： 491-67-8 伊紅 Y, 醇溶性 CAS15086-94-9 10g
磷酸化蛋白富集試劑盒 131066-10 10 次
1個(gè) 雜交管 (35×200mm)
2mL 鏈霉親和素磁珠
100 支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅帶芯 )
20μL Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)
0.25mL GTP 溶液，100mM
總 SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 ) 18-0710-100 100 次
DNA 探針變性液 131208-10 10mL
300U TEV 蛋白酶
10mL 非凍型血液 RNA 保存液
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬(wàn) )
100 次 哺乳動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix
聚乙烯醇 CAS9002-89-5 100g
Western 印跡膜抗體清除劑 80813-50 50mL
RNase 抑制劑 ( 人源 ) 3290-400 400U
5g 牛血紅蛋白
1mL AH109 酵母種
1mg Quin-2AM
100mL 沉淀型 TMB 顯色試劑盒
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 ) 22-0580-25 25mg
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