詳細(xì)介紹
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 來(lái)源于狗腎細(xì)胞MDCK,可以形成隆突。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:6~1:10傳代;2~3天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲胺鈉鹽(TOOS) 分子式: 331.4 分子量: C12H18NNaO4S·2H2O 英文名稱: N- ethyl -3- (2- hydroxy -3-) -N- methyl aniline sodium (TOOS) CAS號(hào): 82692-93-1
正辛基硫醇 分子式: 分子量: 英文名稱: N-octyl mercaptan CAS號(hào):
乙二醇丁 分子式: 118.17 分子量: C6H14O2 英文名稱: Ethylene glycol butyl ether CAS號(hào): 111-76-2
1-乙酯甲基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 分子式: 分子量: 英文名稱: 1- ethyl methyl -3- six f CAS號(hào): 503439-50-7
無(wú)花果蛋白酶 分子式: 分子量: 英文名稱: Fig protease CAS號(hào): 819
粉唑醇 分子式: 301.29 分子量: C16H13F2N3O 英文名稱: Flutriafol CAS號(hào): 76674-21-0
奧沙利鉑 分子式: 397.3 g/mol 分子量: C8H14N2O4Pt 英文名稱: Oxaliplatin CAS號(hào): 63121-00-6
氧化萎銹靈 分子式: 267.3 分子量: C12H13NO4S 英文名稱: Oxycarboxin CAS號(hào): 5259-88-1
紫草素 分子式: 288.3 分子量: C16H16O5 英文名稱: Shikonin CAS號(hào): 517-89-5
鹽酸藥根堿 分子式: 373.8301 分子量: C20H20ClNO4 英文名稱: Hydrochloric acid CAS號(hào): 6681-15-8
五內(nèi)脂 分子式: 468.677 分子量: C30H44O4 英文名稱: Body fat CAS號(hào): 136040-43-2
人參皂苷Rb3 分子式: 1079.2685 分子量: C53H90O22 英文名稱: Ginsenoside Rb3 CAS號(hào): 68406-26-81000μL 小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗
胰蛋白酶,質(zhì)譜 131029-100 100μg
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑 60901-0.3 0.3mL
10g 土鹽
500mL F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
1g 石榴紅硫
250U Red-KOD DNA 聚合酶
吸附樹脂 XAD7 CAS37380-43-1 100g
古細(xì)種屬鑒定 PCR Mix 1 131131A-100 100 次
100 次 細(xì) RNAout
50 次 革氏陽(yáng)性細(xì)質(zhì)粒 DNAout
1g 1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯
50 次 柱式 G+細(xì) RNAout
DEAE 葡聚糖凝膠 A-25 CAS12609-80-2 25g
JM83 種 12-145 1mL
100g 鹽酸胍
500mL IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
25g 抗壞血酸
1mg 生物素化的堿性磷酸酶 (AP)
蘇木色精 CAS517-28-2 10g
紅溶液 ,100mg/mL 120690-10 10mL
25g 乙烯利