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狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格

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更新時(shí)間:2017-01-23 09:59:43瀏覽次數(shù):314

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome價(jià)格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  來(lái)源于狗腎細(xì)胞MDCK,可以形成隆突。 
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法  1:6~1:10傳代;2~3天1次。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲胺鈉鹽(TOOS)    分子式:    331.4    分子量:     C12H18NNaO4S·2H2O    英文名稱:    N- ethyl -3- (2- hydroxy -3-) -N- methyl aniline sodium (TOOS)    CAS號(hào):    82692-93-1    
 正辛基硫醇    分子式:        分子量:        英文名稱:    N-octyl mercaptan    CAS號(hào):        
 乙二醇丁    分子式:    118.17    分子量:     C6H14O2    英文名稱:    Ethylene glycol butyl ether    CAS號(hào):    111-76-2    
1-乙酯甲基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽    分子式:        分子量:        英文名稱:    1- ethyl methyl -3- six f    CAS號(hào):    503439-50-7    
 無(wú)花果蛋白酶    分子式:        分子量:        英文名稱:    Fig protease    CAS號(hào):    819    
 粉唑醇    分子式:    301.29    分子量:     C16H13F2N3O    英文名稱:    Flutriafol    CAS號(hào):    76674-21-0    
 奧沙利鉑    分子式:     397.3 g/mol    分子量:     C8H14N2O4Pt    英文名稱:    Oxaliplatin    CAS號(hào):    63121-00-6    
 氧化萎銹靈    分子式:    267.3    分子量:    C12H13NO4S    英文名稱:    Oxycarboxin    CAS號(hào):    5259-88-1    
 紫草素     分子式:    288.3    分子量:    C16H16O5    英文名稱:    Shikonin    CAS號(hào):    517-89-5    
 鹽酸藥根堿    分子式:    373.8301    分子量:    C20H20ClNO4    英文名稱:    Hydrochloric acid    CAS號(hào):    6681-15-8    
 五內(nèi)脂    分子式:    468.677    分子量:    C30H44O4    英文名稱:    Body fat    CAS號(hào):    136040-43-2    
 人參皂苷Rb3    分子式:    1079.2685    分子量:    C53H90O22    英文名稱:    Ginsenoside Rb3    CAS號(hào):    68406-26-81000μL    小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗    
胰蛋白酶,質(zhì)譜    131029-100    100μg
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑    60901-0.3    0.3mL
10g    土鹽    
500mL    F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )    
1g    石榴紅硫    
250U    Red-KOD DNA 聚合酶    
吸附樹脂 XAD7    CAS37380-43-1    100g
古細(xì)種屬鑒定 PCR Mix 1    131131A-100    100 次
100 次    細(xì) RNAout    
50 次    革氏陽(yáng)性細(xì)質(zhì)粒 DNAout    
1g    1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯    
50 次    柱式 G+細(xì) RNAout    
DEAE 葡聚糖凝膠 A-25    CAS12609-80-2    25g
JM83 種    12-145    1mL
100g    鹽酸胍    
500mL    IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )    
25g    抗壞血酸    
1mg    生物素化的堿性磷酸酶 (AP)    
蘇木色精    CAS517-28-2    10g
紅溶液 ,100mg/mL    120690-10    10mL
25g    乙烯利    

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