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詳細(xì)介紹
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；SMC價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；SMC價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞來源于兔主動(dòng)脈，常用作動(dòng)脈粥樣硬化的研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體 40~44
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
穿心蓮內(nèi)酯 分子式： 350.4492 分子量： C20H30O5 英文名稱： Andrographolide CAS號(hào)： 5508-58-7
酸性橙74 分子式： 441.35 分子量： C16H12N5NaO7S 英文名稱： Acid orange 74 CAS號(hào)： 10127-27-2
酸性媒介橙R 分子式： 分子量： 英文名稱： Acid medium orange R CAS號(hào)： VDDSV
酸性藍(lán)BGA 分子式： 分子量： 英文名稱： Acid blue BGA CAS號(hào)：
次甲基藍(lán) 分子式： 373.9 分子量： C16H18ClN3S·3H2O 英文名稱： Methylene blue CAS號(hào)： 7220-79-3
異丁酸納 分子式： 分子量： 英文名稱： ISO butyrate CAS號(hào)： 996-30-5
3-苯甲基-5-(2-羥基乙基)-4-甲基噻唑啉氯 分子式： 269.79 分子量： C13H16ClNOS 英文名稱： 3- -5- (2- hydroxy ethyl benzene methyl) -4- methyl thiazole chloride CAS號(hào)： 4568-71-2
磷鉬酸 分子式： 1861.43(無水計(jì)) 分子量： H7〔P(Mo2O7)6〕·XH2O 英文名稱： Phosphomolybdic acid CAS號(hào)： 51429-74-4
芐橙 分子式： 801.78 分子量： C35H25N5Na2O9S3 英文名稱： Benzyl orange CAS號(hào)： 2429-80-3
5KU β- 半乳糖苷酶
50 T 丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過氧化物測(cè)試盒
膠原酶Ⅳ型 CAS9001-12-1 100mg
兔抗雞 IgY，辣根過氧化物酶標(biāo)記 131152-300 300μL
柱式軟骨 RNAout 101121-50 50 次
1g n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
1個(gè) 4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)
5mL 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 -2
1.5mL DNA 尿素 -PAGE 上樣液
少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 21-0340-5 5mL
RNA Guanidium HCl ( 鹽酸胍 ) 101224-100 100g
1mg PMA/TPA (PKC 激活劑 )
1mL BJ5183 種
5mg L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )
500 次 MTT 檢測(cè)試劑盒
LY294002(PI3K 抑制劑 ) 23-0460-1 1mg
一管式植物 DNAout 60705-500 500 次
100g RNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
12x50nm Cyanine 3-NHS Ester
50 次 加 T 試劑盒
1個(gè) 15mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)
Hoechst33342 干粉 130865-10 10mg
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