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盤羊皮膚細(xì)胞；ASHS3價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

盤羊皮膚細(xì)胞；ASHS3價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一雌性盤羊的耳組織。1997年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%FBS
傳代方法  1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

 三十四烷    分子式：    478.92    分子量：     C34H70    英文名稱：    Thirty-four alkanes    CAS號(hào)：    14167-59-0    
 二乙二醇單丁    分子式：    162.23    分子量：     C8H18O3    英文名稱：    Diethylene glycol monobutyl ether    CAS號(hào)：    112-34-5    
 甲基萘    分子式：    142.1971    分子量：     C11H10    英文名稱：    Methyl naphthalene    CAS號(hào)：    1321-94-4    
 異惡唑草酮    分子式：    359.32    分子量：     C15H12F3NO4S    英文名稱：    Isoxazole clomazone    CAS號(hào)：    141112-29-0    
 硬脂酸紅霉素    分子式：    1018.4    分子量：     C37H67NO13· C18    英文名稱：    Erythromycin stearate    CAS號(hào)：    643-22-1    
 地米還原物    分子式：    420.47    分子量：     C23H29FO6    英文名稱：    Ground rice reduction    CAS號(hào)：    7793-38-6    
 鹽酸青藤堿    分子式：    365.85    分子量：    C19H23NO4·HCl    英文名稱：    Sinomenine hydrochloride    CAS號(hào)：    6080-33-7    
 地高辛    分子式：    780.94    分子量：    C41H64O14    英文名稱：    Digoxin    CAS號(hào)：    20830-75-5    
 亞麻木酚素    分子式：    686.71    分子量：    C32H46O16    英文名稱：    Flax phenol    CAS號(hào)：    148244-82-0    
 血根堿    分子式：    332.32946    分子量：    C20H14NO4+    英文名稱：    Sanguinarine    CAS號(hào)：    2447-54-31mL    SMD1168H 酵母種    
小鼠基因組 DNA    131033-100    100μg
Tuner(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    130562-10    0.1mL×10
1000μL    小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗    
5g    甲基橙    
100g    氯化    
400U    NdeI    
10 管    種保存液    
Forskolin( 苷酸環(huán)化酶激活劑 )    23-0250-1    1mg
非酶多糖清除劑 (DNA )    111008-50    50 次
5L    SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )    
0.5mL    dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )    
5次    包涵體中量純化試劑盒    
50 次    石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒    
固藍(lán) RR 鹽    CAS14726-29-5    5g
蛋白折疊試劑盒    131121-100    100 次
20L    長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(2-30KD)    
100 次    兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix    
1個(gè)    15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)    
5mg    Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )    
100g    聚乙二醇    
總抗氧化能力檢測試劑盒 (FRAP 法 )    18-0770-100    100 次
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )    70904B-1.5    1.5mL
100U    Therminator II DNA 聚合酶    
1.5mL    非酶 DNA 清除劑    
10g    聚蔗糖 400