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詳細(xì)介紹
盤(pán)羊皮膚細(xì)胞；OAM-S1價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
盤(pán)羊皮膚細(xì)胞；OAM-S1價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性盤(pán)羊的皮膚組織。1996年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
堿性藍(lán)G 分子式： 分子量： 英文名稱： Alkaline blue G CAS號(hào)：
熒光桃紅B 分子式： 829.63 分子量： C20H2Br4Cl4Na2O5 英文名稱： Phloxine B CAS號(hào)： 18472-87-2
氯磷酸二異丙酯 分子式： 200.6 分子量： C6H14ClO3P 英文名稱： Two isopropyl chloride phosphate CAS號(hào)： 2574-25-6
仲丁基溴化鎂 分子式： 161.32 分子量： C4H9BrMg 英文名稱： Zhong Dingji bromide CAS號(hào)： 922-66-7
靛蘭胭脂紅 分子式： 分子量： 英文名稱： Indigo carmine CAS號(hào)：
變色酸 分子式： 320.3 分子量： C10H8O8S2 英文名稱： Discoloration acid CAS號(hào)： 148-25-4
酸性 S-RL 分子式： 分子量： 英文名稱： Acid black S-RL CAS號(hào)：
3-羥基-2,4,6-三碘苯甲酸（HTBA） 分子式： 515.81 分子量： C7H3I3O3 英文名稱： 3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA) CAS號(hào)： 53279-72-4
氯代正丁烷 分子式： 92.57 分子量： C4H9Cl 英文名稱： Chlorinated butyl CAS號(hào)： 109-69-3植物種屬鑒定 PCR Mix 2 131129B-100 100 次
10×100μL XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞
5mL 肝素瓊脂糖
10g N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸
10 次 柱式血液 mtDNAout，測(cè)序
結(jié)晶紫 CAS548-62-9 25g
C43(DE3) 種 12-228 1mL
100 次 血液保存和 DNA 純化套裝
48 T 紅細(xì)胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測(cè)試盒
5g 蘇丹 B
10 次 糖蛋白染色試劑盒
L- 谷氨酰胺 CAS56-85-9 25g
MAL 指示劑培養(yǎng)基 130898-100 100mL
25g 胰蛋白酶 1：250
100mg 膠原酶Ⅰ型
1g 溴甲酚綠
0.1mg 山羊抗兔 IgG，熒光素 555 標(biāo)記
氯化硝基四氮唑蘭 CAS298-83-9 500mg
小鼠抗 GFP 標(biāo)簽單抗 130580-1000 1000μL
5次 植物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )
25g L- 精氨
25g QAE 葡聚糖凝膠 A-50
20 μg 哺乳動(dòng)物雙雜交試劑盒
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