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詳細(xì)介紹
豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞；ZYM-SVEC01價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞；ZYM-SVEC01價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HCT-8(人盲腸腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
中分子量單一蛋白Marker（45 kD） 50次 國(guó)產(chǎn)
CC-801全細(xì)胞裂解液 100ug 100ug
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 英文名稱： b16
水解酪蛋白(酸)/酸水解酪蛋白/酸水解干酪素/Casein acid hydrolysate BR 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250/1000克
Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+) 規(guī)格： 500ml
人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
C-33 A(人子宮頸細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小檗堿 規(guī)格： 1g/支；98%
人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 英文名稱： C918
Hanks’平衡鹽/Hanks’ Balanced Salt solution 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 500毫升
人胚膚成纖維樣細(xì)胞 英文名稱： HES
YM瓊脂/YM Agar 霉菌/酵母菌和耐酸菌的分離培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人非小細(xì)胞肺細(xì)胞 英文名稱： NCI-H1299
酵母浸出粉/酵母粉/干酵母/酵母提取物/酵母浸粉/酵母浸膏粉/酵母萃取物/酵母抽提物/Yeast extract powder BR 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250/500克
大鼠雪旺氏細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂/葡萄糖胰酪胨瓊脂/DTA培養(yǎng)基/Dextrose Tryptone Agar 嗜熱菌芽孢（需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢）分離培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
成人真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL 兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 131128I-100 100 次
2000U XhoI
100mL 甘油
25g L- 脯氨酸
10 次 Southern 植物 DNAout
膠原蛋白Ⅰ型 CAS9007-34-5 1g
BL21-CodonPlus-RP 種 12-224 1mL
15 次 血清白蛋白清除劑
100KU 核糖核酸酶 T1
5g 萘啶酮酸
250 次 還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒
葡萄糖 -6- 磷酸二 CAS3671-99-6 500mg
種保存液 100827A-10 10 管
10g 伊紅 Y 二鹽，水溶性
100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B
100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B
0.1mg 山羊抗小鼠 IgG，熒光素 488 標(biāo)記
萘酚 AS-TR 磷 CAS4264-93-1 25mg
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