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詳細(xì)介紹
豬腎傳代細(xì)胞；IBRS-2價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
豬腎傳代細(xì)胞；IBRS-2價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1：3～1：6傳代；2～3天傳代一次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
J82(人膀胱細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
DU 145(人前列腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Glutathione-Triethyleneglycocyl-Sepharose 6B/GST瓊脂糖凝膠 2ml、10ml 國(guó)產(chǎn)
小鼠小腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BGC823(人胃細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 英文名稱： raw264.7
馬松(Masson)三色法染色試劑盒 規(guī)格： 500ml
人胃腺細(xì)胞 英文名稱： AGS
LB肉湯/LB Broth 用于細(xì)菌增菌培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 英文名稱： HS683
布氏肉湯/Brucella Broth 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人腸微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
抗生素Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/抗生素2號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/Antibiotic Agar NO.2 四環(huán)素、土霉素等的效價(jià)測(cè)定 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
大鼠視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
瓊脂條/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/Agar BR 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
液體沙氏培養(yǎng)基/沙氏液體培養(yǎng)基/Liquid Sabourand Medium 真菌、酵母菌增菌培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
250 次 柱式凍存血液 DNAout
10,000U 冷啟動(dòng)核酸酶
100mL 曲拉通 X-100
1mL 微量單鏈 DNA 定量試劑盒
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽 CAS1185-53-1 100g
麗春紅 S 染膜液 100924-250 250mL
25mg γ- 環(huán)狀糊精
1mg MG-132(Proteasome 抑制劑 )
1g 1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯
100 次 脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測(cè)試劑盒
100mL DNA 鹽酸胍溶液，8M
PFG 固定液 131292-250 250 mL
磁珠法 mRNA 提取試劑盒 131193-25 25 次
30 次 凝固血液 DNAout
1mg Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )
10mg Lucigenin( 光澤精 )
250U KOD DNA 聚合酶
Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 ) 22-0460-50 50μL
白細(xì)胞裂解液 130989-100 100mL
1g 羥基脲
100g 丙烯酰胺
50 次 一管式病毒 RNAout
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