詳細(xì)介紹
猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
腺 英文名稱: MA891瘤
ASS瓊脂/抗菌素磺胺類敏感試驗(yàn)瓊脂/ASS Agar 用于磺胺類靈敏度試驗(yàn)(WHO方法) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人腺細(xì)胞 英文名稱: Hs 578T
改良Y培養(yǎng)基/Y Medium Modified 分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 gersion
人支氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
仔副菌培養(yǎng)基 國產(chǎn)/進(jìn)口 1萬毫升/袋
DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar 食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人髂動(dòng)脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
TTC瓊脂基礎(chǔ)/三苯四唑瓊脂基礎(chǔ)/氯化三苯四氮瓊脂基礎(chǔ)/紅四氮唑瓊脂基礎(chǔ)/三苯基氯化四氮唑瓊脂基礎(chǔ)/TTC Agar Base 彎曲桿菌的TTC試驗(yàn) 國產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人肺腺細(xì)胞 英文名稱: NCI-H1395
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)添加劑/Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement 加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)中 國產(chǎn)/進(jìn)口 5毫升 5g 鳥苷
5次 96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )
5mg Dihydroethidium( 超氧化物陰離子熒光探針 )
20L 濕法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )
DiIC1(5) 碘化物 22-0250-100 100mg
真空抽濾盒 140662-1 1套
25g 葡聚糖凝膠 G-15
5次 包涵體中量純化試劑盒
2mg Trequinsin(PDE III 抑制劑 )
1000U 綠豆核酸酶
Vinblastine( 長春新堿 ) 23-0820-100 100μL
Southern 細(xì) (G+)DNAout 130951-10 10 次
100 T ROS 活性氧檢測試劑盒
10Ku 超氧化物歧化酶
50 次 柱式植物 DNAout
200mL 大鼠瘤細(xì)胞分離液 1.061
超氧化物試劑盒 18-0190-100 100 次
DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 ) 101216-100 100g
1mL SURE 種
50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λ/EcoR I+ Hind III
50 次 柱式土壤 DNAout
1mL SURE 種
Phusion DNA 聚合酶 130429-250 250U
一管式 DNA 膠回收試劑盒 60706-100 100 次