詳細介紹
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 FRhK-4細胞株來自300克重恒河猴正常雌性胚胎的腎組織。該細胞系是上皮細胞樣的連續(xù)細胞株,且已被數(shù)家實驗室用作甲型肝炎研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C57
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri
大鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
蕁麻青霉 Penicillium urticae
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RSC96(大鼠雪旺細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌
U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤)5×106cells/瓶×2
日溝維腸桿菌 Enterobacter gergoviae
白堊色鐮孢
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HCT-8(人盲腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中華根瘤菌
SDS-PAGE濃膠緩沖液(4x)200ml國產(chǎn)
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti
OVCAR-3(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2gersion
植物桿菌 Lactobacillus plantarum核糖核酸酶 B CAS9001-99-4 100mg
D-Hanks 溶液 100927-100 100mL
細 RNAout 51102-250 250 次
10g Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯
5μg 6nt 隨機引物,0.5μg/μL
100mg Calcein M
100mL DNA Sarkosyl 溶液,10%
Cyanine 3-NHS Ester 22-0140-12 12x50nm
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 ) 17-019-1000 1000 支
5mL 平滑肌細胞生長因子 ( 不含血清 )
10 次 百萬堿基細 (G+)DNAout
1g SNP(NO 供體 )
25000U T7 RNA 聚合酶
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 ) 23-0720-2 2g
線狀 DNA 清除劑 101101-30 30 次
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5
25mL 超敏化學發(fā)光 (HRP) 檢測試劑盒(ECL)
100mL 紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 )
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]價格10mL 鏈脲佐素溶液 ,10mg/mL
GSH 試劑盒 ( 谷胱甘肽測試盒 )( 比色法 ) 18-0090-50 50 T
DNA Tris HCl,1M,pH8.0 101206-100 100mL
100mL SSPE 溶液 ,20×
50 次 DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)
1mL 綠如藍染料,PCR