SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-7*直銷

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-7*直銷采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-7*直銷操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-7*直銷現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV40病毒突變體得到；編碼表達(dá)野生型T抗原，所以該細(xì)胞適合作為需要SV40 T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，允許SV40病毒的溶解性生長，支持40℃時(shí)溫度敏感性A209病毒的復(fù)制，支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復(fù)制。因含有SV40病毒的DNA序列，該細(xì)胞需要在2級(jí)生物安全柜中操作。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  51-129
使用權(quán)限 A類

運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
GNM(人口腔鱗頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
香菇 Lentinula edodes
786-O(人腎透細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
苜蓿中華根瘤菌
RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
圣堡羅沙門氏菌 Salmonella saintpaul
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus4次    大提柱式細(xì) DNAout    
500U    尿嘧啶 -DNA 糖基化酶    
溴酚藍(lán)    CAS115-39-9    5g
Y2HGold 酵母種    12-194    1mL
20 次    一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝    
10 次    克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒    
250mg    直鏈淀粉    
100mL    PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )    
100g    DNA  CTAB( 十六烷基*基溴化銨 )    
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD）     140625-20    20 次
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ    90602H-50    50 次
100g    十二烷基硫酸    
100mL    動(dòng)物 DNAout    
1g    6- 芐基氨基嘌呤    
0.5mL    鏈霉親和素，AP 標(biāo)記    
L-(+) 乳酸鋰鹽    CAS27848-80-2    5g
E-64 蛋白酶抑制劑，20mg/mL    130541-10    10mL
50 次    柱式昆蟲 DNAout    
100mg    Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )    
200 次    ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒    
250mL    動(dòng)物 DNAout    
10mL    DNA 稀釋液    
蝦堿性磷酸酶    120403-300    300U