詳細介紹
草魚肝臟細胞;L8824價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
草魚肝臟細胞;L8824價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 草魚肝臟細胞由長江水產(chǎn)所建立鑒定,用于草魚基礎研究和病毒疾病防治研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
漢遜德巴利酵母 Bacillus thuringiensis
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
人膀胱細胞英文名稱:5637
尖孢鐮刀菌瓜?;?Fusarium oxysporium f. sp. niveum
木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
RSC, 大鼠雪旺細胞 Rattus
異酒香酵母 Brettanomyces anomalus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MFC-GFP(小鼠前胃細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2
中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis
無花果曲霉 Aspergillus ficuum
大鼠心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3-Fluoro-4-aminobenzonitrile 4-氨基-3- 63069-50-1
Sweroside 獐牙菜苷 14215-86-2
3-Indoleacetamide 3-吲哚乙酰胺 879-37-8
Piperonyl butoxide 胡椒基丁 1951/3/6
2,5-Dichlorothiophene 2,5-二噻吩 3172-52-9
Ranitidine hydrochloride 雷尼替丁 66357-35-5
Ammothamnine 氧化苦參 16837-52-8
2-Methylbutyl 2-methylbutyrate 2-基-丁酸-2-基丁酯 2445-78-5
D-(+)-Cellobiose D-纖維二糖 528-50-7
PHOSPHATIDYLETHANOLAMINE 腦磷脂 90989-93-8
Carabrone 天名精內(nèi)酯 1748-81-8
Veratraldehyde 3,4-二氧基 120-14-9
1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE 1-萘磷酸單,一水 81012-89-7
TRIMETHYLSILYLMETHYLMAGNESIUM CHLORIDE (三基硅烷)基化鎂 13170-43-9
S-SODIUM ETHANETHIOSULFONATE 乙硫代磺酸 31999-88-9
4-Aminobenzonitrile 對氨基 873-74-5
Potassium fluoride 化鉀 7789-23-3
1,3-Phenylenediamine sulfate 間硫酸 541-70-8
Diphenyl phosphate 磷酸二酯 838-85-7
METHYL-ALPHA-D-MANNOPYRANOSIDE α-基-D-甘露糖苷 617-04-9
ISOPIMPINELLIN 異茴芹靈 482-27-9
BETA-NICOTINAMIDE ADENINE DINUCLEOTIDE PHOSPHATE SODIUM SALT β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 1184-16-3
N-Nitrosodiphenylamine 亞基 86-30-6