真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次特點 返回列表頁

真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次特點使用方法：
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例，如果反應(yīng)體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次（見注） 72℃ 1 分鐘注：易錯 PCR 一般不需要熱啟動，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預(yù)計長度的 PCR 產(chǎn)物。

真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次特點產(chǎn)品及特點：
易錯 PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單，但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點，則可使產(chǎn)物克隆到表達載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物，對于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴增。 
產(chǎn)品介紹：

規(guī)格及成分：

pMBP-P(pMBPP)(60908-4910)y
pMCSG33
pMCSG68
pmKate2-N（pmKate2N）
pMT/BiP/V5-His B(pMTBiPV5HisB)
pNO1517
pPAmCherry1-C1
pPD95_18(pPD9518)
pPRIME-CMV-dsRed-recipient(pPRIMECMVdsRedrecipient)
pQCXP CMV/TO DEST(pQCXPCMVTODEST) (w360-1)
pRc/RSV(pRcRSV)
pRL-TK(pRLTK)(60908-5940)y
pRX-3(pRX3)
pSG111RTE(大鼠氣管上皮細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
青藤堿規(guī)格：20mg/支；98%
大鼠子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NIH/3T3(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2gersion
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
日本根霉
人結(jié)腸細胞英文名稱：CW-2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
果形正青霉 Micromonospora violaceofusca
蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis
大鼠晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草) Cordyceps militaris
香菇 Lentinula edodes
293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
pSM17
pSuperRetro control（pSuperRetrocontrol）
pTAG-1(pTAG1)
pTK-Hyg(pTKHyg)（60908-6550）
pTRV2(60908-6688)