詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1374 |
名稱 大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞
2.組織來源:腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞分離自下丘腦;下丘腦又稱丘腦下部,位于大腦腹面、丘腦的下方,是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和內(nèi)分泌活動的較高級神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部(又名視前區(qū)和視上區(qū))﹑中部(結(jié)節(jié)區(qū))和后部(乳頭體區(qū))。下丘腦具有許多細(xì)胞核團(tuán)和纖維束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系,可以接受很多神經(jīng)沖動,為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能,合成神經(jīng)垂體激素及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進(jìn)行體外培養(yǎng),建立下丘腦神經(jīng)元體外實(shí)驗(yàn)平臺具有重要意義。
5.方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
銅綠假單胞菌CMCC10104凍干粉 玉蕈、真姬菇
間型酒香酵母 解脂假絲酵母
肉葡萄球菌 粗糙脈孢菌
光孢短柄帚霉 根霉屬的種
異常漢遜酵母 苦杏仁甙發(fā)酵管5ml 30 支/盒
人HSP60 IgG抗體elisa分析檢測試劑盒
人HSP60 IgA抗體elisa分析檢測試劑盒
人H-ras elisa分析檢測試劑盒
人HLAⅡ類組織相容性抗原,DPα1鏈(HLA-DPA1)ELSIA 試劑盒
人HIV-1 TAT互動蛋白2(HTATIP2/TIP30)elisa分析檢測試劑盒
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞小鼠半乳糖凝集素9(GAL9)elisa檢測試劑盒
小鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa分析檢測試劑盒
小鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測試劑盒
小鼠胞內(nèi)氯離子通道蛋白1(CLIC1)elisa分析檢測試劑盒
小鼠胞內(nèi)氯離子通道蛋白1(CLIC1)elisa檢測試劑盒
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