RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞)

RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞)公司其它各種產(chǎn)品0酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 神經(jīng)叢蛋白A3抗體
3號染色體開放閱讀框34抗體 神經(jīng)叢蛋白A2抗體
0酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 神經(jīng)叢蛋白A1抗體
細胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體 神經(jīng)保護肽HN抗體
免疫球蛋白G Fc段受體I 神經(jīng)氨酸酶4抗體

冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品屬性：

名稱    RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞)
種屬 恒河猴

年齡（性別） 胎兒

組織來源 脈絡(luò)膜；視網(wǎng)膜；內(nèi)皮細胞；正常

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述 RF/6A細胞在早期自發(fā)轉(zhuǎn)化并已傳代540次以上；電鏡下觀察到Weibel-Palade顆粒。高代次的RF/6A細胞用作滋養(yǎng)層以增強貼壁，轉(zhuǎn)接能力和供養(yǎng)眼色素層黑素細胞。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 MEMMEM(PM150467)(ATCC改良)(PM150467)＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達情況 factor VIII; fibronectin

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1780

培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
短波單胞菌   黃柄曲霉

血瓊脂平板(BAP)[血平板]90mm   橢圓釀酒酵母

副溶血性弧菌   枯草芽孢桿菌

人蒼白桿菌   金龜子綠僵菌小孢變種

紫色鏈霉菌   灰樹花
大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)elisa檢測試劑盒

大鼠癌胚抗原(CEA)elisa檢測試劑盒

大鼠阿米洛利敏感鈉通道α亞基(SCNN1A)elisa檢測試劑盒

大鼠阿立新A(Orexin A)elisa檢測試劑盒

大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa檢測試劑盒
RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞)大鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)elisa檢測試劑盒

大鼠脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)elisa檢測試劑盒

大鼠脂素1(LPIN1)elisa檢測試劑盒

大鼠脂酰A合成酶(ACS)elisa檢測試劑盒

大鼠脂氧素A4(LXA4)elisa檢測試劑盒
實驗報告：
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。