我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
名稱 PA-1 (卵巢畸胎瘤細(xì)胞)(STR鑒定正確)
別稱 PA1; PA I; PAI
種屬 人類
年齡(性別) 女性,12歲
組織來源 卵巢;源自轉(zhuǎn)移部位:腹水
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 PA-1細(xì)胞是從一名12歲的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔積液中分離建立的;PA-1細(xì)胞可以形成緊密的編織狀的克隆,在低血清培養(yǎng)、低密度接種或用5-Bromo-2'-Deoxyuridine處理時可以分化為胚狀體。PA-1細(xì)胞表達(dá)胚胎抗原PCC4,但未檢測到F9的表達(dá)。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~36小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
抗原表達(dá)情況 HLA A28, B12
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1572 ECACC; 90013101
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 5次 考馬斯亮藍(lán) G-250 染液250mL
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次 抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL1mL
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次 菌體內(nèi)毒素清除劑200mL
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 A5次 菌落 PCR 試劑盒 2.050 次
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次 聚乙二醇100g
FITC標(biāo)記的磷酸化蛋白激酶B抗體
FITC標(biāo)記的磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體
FITC標(biāo)記的粘附相關(guān)激酶抗體
FITC標(biāo)記的發(fā)育分化增強因子1抗體
FITC標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體
PA-1 (卵巢畸胎瘤細(xì)胞)大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)elisa檢測試劑盒
大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)elisa檢測試劑盒
大鼠彈力蛋白酶elisa分析檢測試劑盒
大鼠彈力蛋白酶elisa檢測試劑盒
大鼠彈性蛋白(ELN)elisa分析檢測試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。