細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
名稱 SW620 (結(jié)腸癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 SW-620; SW 620; SW.620
種屬 人類
年齡(性別) 男性,51歲
組織來源 結(jié)直腸腺癌,來自轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 SW620細(xì)胞是從一個(gè)51歲男性白人組織中分離得到的,由A·Leibovitz等從一個(gè)淋巴結(jié)建株。SW620細(xì)胞主要由無絨毛的小園球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成;SW620細(xì)胞僅合成少量癌胚抗原(CEA),在裸鼠中有高度的致瘤性。
生物安全等級(jí) 1
生長培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~20-26小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,100%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+
基因表達(dá)情況 Carcinoembryonic antigen (CEA) 0.15 ng/10^6 cells/10 days; transforming growth factor alpha; matrilysin. The cells are negative for expression of CSAp (CSAp-) and colon antigen 3, negative. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis and fos oncogenes.
注意事項(xiàng) 1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性; 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養(yǎng)基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳; 2、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,請(qǐng)聯(lián)系銷售下單備注更改。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-227 ECACC; 87051203
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使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
CLEC2D蛋白抗體
促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體
皮層肌動(dòng)蛋白抗體
促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體
胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體
大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ras相關(guān)蛋白Rab-11A elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ras相關(guān)C3底物1(RAC1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
SW620 (結(jié)腸癌細(xì)胞)大鼠E選擇素(E-Sel)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠E選擇素(SELE)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉素相關(guān)蛋白1(FRAP1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉素相關(guān)蛋白1(FRAP1)elisa檢測(cè)試劑盒
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