Hep G2 (肝癌細(xì)胞)

Hep G2 (肝癌細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-600 bp)50 次 去離子甲酰胺100mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次 去垢劑去除樹脂10mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-200 bp)50 次 巰基磁珠 2mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (200-5000 bp)50 次 瓊脂糖100g
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (250-

產(chǎn)品屬性：

名稱    Hep G2 (肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 HEP-G2; Hep G2; HEP G2; HepG2; HEPG2

種屬 人類

年齡（性別） 男性，15歲

組織來源 肝細(xì)胞癌

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 Hep G2細(xì)胞是來自15歲男性白人的組織；Hep G2細(xì)胞形態(tài)為上皮細(xì)胞樣，模式染色體數(shù)為55；Hep G2細(xì)胞在免疫抑制小鼠中不致瘤。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:3

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~50-60小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HB-8065 BCRC; 60025 BCRJ; 0103 DSMZ; ACC-180 ECACC; 85011430

冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )1次  柱式酵母質(zhì)粒 DNAout50 次

96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )5次  柱式酵母 DNAout50 次

96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1次  柱式醬油 DNAout10 次

沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次  柱式海洋動(dòng)物 DNAout50 次

一站式柱式 miRNAout50 次  柱式骨骼 DNAout50 次
大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa檢測(cè)試劑盒
Hep G2 (肝癌細(xì)胞)倉(cāng)鼠γ干擾素(IFNG)elisa分析檢測(cè)試劑盒

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