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我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產品僅用于科研
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0072 |
名稱 Daudi (Burkitt's淋巴瘤細胞) (STR鑒定正確)
別稱 DAUDI; NK-10A; NK-10a; NK 10a; NK10a; GM03190; GM3190; GM17346
種屬 人類
年齡(性別) 男性,16歲
組織來源 外周血;B淋巴母細胞;Burkitt's淋巴瘤
生長特性 懸浮細胞
細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣
背景描述 Daudi細胞是由E·Klein和G·Klein于1967年5月從一位16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的。Daudi細胞表面免疫球蛋白陽性(sIg+)、Β2-微球蛋白陰性,EBNA陽性,并有衣殼抗原VCA;Daudi細胞攜帶EB病毒。Daudi細胞是典型的B淋巴母細胞,廣泛應用于白血病發(fā)生機理的研究。
生物安全等級 2
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-48小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; forms colonies in agarose.
受體表達情況 complement, expressed; Fc, expressed
注意事項 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。
保藏機構 ATCC; CCL-213 BCRC; 60192 Coriell; GM03190 Coriell; GM17346 DSMZ; ACC-78 ECACC; 85011437 ECACC; 94071449
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3.細胞傳代
1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
4× 核酸液相雜交液10mL 核酸清除劑1.5mL
DNA 稀釋液10mL 核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次
DNA 溶解液10mL 海藻糖溶液,1.5M,PCR 級1.5mL
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL 海量 PCR 片段純化試劑盒5次
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL 還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次
大鼠膜相關磷脂酶A2(PLA2G2A)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠膜聯蛋白IV(ANX-IV)elisa檢測試劑盒
大鼠膜聯蛋白I(ANX-I)elisa檢測試劑盒
大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa檢測試劑盒
大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(AMH)elisa檢測試劑盒免費代測
Daudi (Burkitt's淋巴瘤細胞)XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒250T
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T
X線膠片 100張
YT培養(yǎng)基 YT Broth 250g
α1微球蛋白α1- MG試劑盒 R1:40ml×1 R2:10ml×1 膠乳增強
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。