詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0059 |
名稱 CFPAC-1 (胰腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 CFPac-1; CF PAC-1; CF-PAC1; CF-Pac1; CF Pac1; CFPAC1; CFPac1; CFPAC
種屬 人類
年齡(性別) 男性,26歲
組織來源 胰腺管腺癌,肝轉(zhuǎn)移
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 CFPAC-1細胞是胰腺管腺癌細胞系,建自26歲白人男性囊性纖維變性(CF)的肝轉(zhuǎn)移灶。CFPAC-1細胞表達囊性纖維變性跨膜調(diào)節(jié)因子(CFTR),CFPAC-1細胞形態(tài)為上皮細胞樣且頂端微絨毛極化。CFPAC-1細胞表達胰腺管細胞特征性的細胞角蛋白和癌胚抗原,倍增時間為30-32小時。CFPAC-1細胞是亞3倍體的細胞系,36%的細胞的染色體模式數(shù)為75。CFPAC-1細胞傳代至24代時,可在免疫抑制小鼠中致瘤。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 IMDM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~30-45小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (passage 34)
抗原表達情況 CA19-9 antigen, 12000 units/mL, epithelial keratins
基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL; epithelial keratins
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2號染色體開放閱讀框3抗體
1號染色體開放閱讀框127抗體
1號染色體開放閱讀框129抗體
1號染色體開放閱讀框130抗體
1號染色體開放閱讀框131抗體
大鼠尿液三葉因子3(TFF-3)elisa檢測試劑盒
大鼠尿微量白蛋白(MAU/ALB)elisa檢測試劑盒
大鼠尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)elisa檢測試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)elisa檢測試劑盒
CFPAC-1 (胰腺癌細胞)SOB培養(yǎng)基SOB Broth 250g
SOC培養(yǎng)基SOC Broth 250g
T4 DNA聚合酶 150U
T4多聚核苷酸激酶 500U
TBS緩沖液10× 500ml
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