人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域（MLKL）elisa試劑盒操作步驟

人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱：human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit   
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

4-(N,N-二甲磺酰)-7-嗪并氧雜惡二唑英文名稱：4-（N，N-二甲磺酰）-7-嗪并氧雜惡二唑CAS號：139332-64-2分子式：311.36分子量：C12H17N5O3S

N--3-(4-溴)咔唑英文名稱：N-3-（4-溴）咔唑CAS號：1028647-93-9分子式：397.9分子量：C24H16NBr

2,4,5-*惡唑英文名稱：2,4,5-*惡唑CAS號：20662-84-4分子式：111.14分子量：C6H9NO

4,5-二氯咪唑英文名稱：4,5-二氯咪唑CAS號：15965-30-7分子式：136.97分子量：C3H2Cl2N2

腈菌唑英文名稱：腈菌唑CAS號：88671-89-0分子式：288.78分子量：C15H17ClN4

2-甲噻唑英文名稱：2-methylthiazoleCAS號：3581-87-1分子式：99.15分子量：C4H5NS

硝酸奧昔康唑英文名稱：NitricacidandnitricacidCAS號：64211-46-7分子式：429.13分子量：C18H13Cl4N3O

3--1H-1,2,4-三氮唑英文名稱：3-three-1H-1,2,4-CAS號：61-82-5分子式：84.08分子量：C2H4N4

3-甲-5異噁唑英文名稱：3-methyl-5aminoisoxazoleCAS號：14678-02-5分子式：98.1分子量：C4H6N2O

6-硝并噻唑英文名稱：6-nitrobenzeneandthiazoleCAS號：2942/6/5分子式：506.52884分子量：C22H26N4O8S

3-甲-5-對甲-1H-吡唑英文名稱：3-methyl-5-tomethylphenyl-1H-CAS號：90861-52-2分子式：分子量：C11H12N2

1-(4-芐)吡唑英文名稱：1-(4-)CAS號：142335-61-3分子式：173.21分子量：C10H11N3

4,5-二碘-1H-咪唑英文名稱：4,5-two-1H-CAS號：15813-09-9分子式：319.87分子量：C3H2I2N2

2-辛并咪唑英文名稱：2-octylbenzimidazoleCAS號：13060-24-7分子式：230.35分子量：C15H22N2

二羥丙咪唑英文名稱：DihydroxypropylimidazoleCAS號：分子式：分子量：

泰妥拉唑英文名稱：Tai,ThaiCAS號：113712-98-4分子式：368.39分子量：C16H17N4NaO3S

1-乙咪唑英文名稱：1-ethylCAS號：7098/7/9分子式：96.13分子量：C5H8N2

N-(4-溴)咔唑英文名稱：N-(4-Bromophenyl)carbazoleCAS號：分子式：分子量：

1-(2-二甲乙)-1H-5-巰-四氮唑英文名稱：1-(2-twomethylaminoethyl)-1H-5-mercaptotetrazoleCAS號：61607-68-9分子式：173.24分子量：C5H11N5S lovo, 人結(jié)腸細胞 Human

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

BT-474(人腺導管細胞)5×106cells/瓶×2

紫芝 Ganoderma japonicum

芽胞桿菌 Bacillus sp.

COLO全細胞裂解液100μg100μg

藍微褐鏈霉菌 Streptomyces cyaneofuscatus

人皮膚成纖維樣細胞英文名稱：HSF

MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

亞側(cè)耳 Hohenbuehelia serotina

AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

紅曲霉 Monascus anka

人高轉(zhuǎn)移肺細胞英文名稱：95-D

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺細胞 Human

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

牛糞枝孢 Cladosporium stercorarium

人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)elisa試劑盒操作步驟膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

小鼠神經(jīng)干細胞（EGFP標記） Mouse

異常畢赤酵母 Pichia anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

HPAC(人胰腺腺泡上皮)5×106cells/瓶×2