人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子（MLZE）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱(chēng)：Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

--2-硫脲嘧啶英文名稱(chēng)：6-phenyl-2-CAS號(hào)：36822-11-4分子式：204.25分子量：C10H8N2OS

4-(2-乙)吡啶英文名稱(chēng)：4-(2-aminoethyl)pyridineCAS號(hào)：13258-63-4分子式：122.17分子量：C7H10N2

2--5-吡啶英文名稱(chēng)：2-amino-5-cyanopyridinesCAS號(hào)：4214-73-7分子式：119.12分子量：C6H5N3

4--5-醛嘧啶英文名稱(chēng)：4-amino-5-CAS號(hào)：16357-83-8分子式：123.1分子量：C5H5N3O

2,4-二氯-5-氟嘧啶英文名稱(chēng)：2,4-two-5-CAS號(hào)：2927-71-1分子式：166.97分子量：C4HCl2FN2

2--4-甲氧-6-甲嘧啶英文名稱(chēng)：2--4-,-6-,methylgroup,aCAS號(hào)：7749-47-5分子式：139.16分子量：C6H9N3O

氯代3,6-二-10-甲吖啶英文名稱(chēng)：Twoami0-chloro3,6-methylacridineCAS號(hào)：86-40-8分子式：259.73分子量：C14H14ClN3

2-(三氟乙酰氧)吡啶英文名稱(chēng)：2-(threef)pyridineCAS號(hào)：96254-05-6分子式：191.11分子量：C7H4F3NO2

異丁司特英文名稱(chēng)：ThespecialCAS號(hào)：50847-11-5分子式：230.31分子量：C14H18N2O

4-甲氧-3,5-二甲-2-吡啶甲醇英文名稱(chēng)：4-methyl-3,5-twomethyl-2-pyridinemethanolCAS號(hào)：86604-78-6分子式：167.21分子量：C9H13NO2

4,4'-二叔丁-2,2'-聯(lián)吡啶英文名稱(chēng)：4,4'-tertbutyl-2,2'-bipyridineCAS號(hào)：72914-19-3分子式：268.4分子量：C18H24N2

2-溴-6-氟吡啶英文名稱(chēng)：2-bromide-6-CAS號(hào)：144100-07-2分子式：175.99分子量：C5H3BrFN

5--2-溴吡啶英文名稱(chēng)：5-amino-2-CAS號(hào)：13534-97-9　分子式：173.01分子量：C5H5BrN2

2-氯-5-碘吡啶英文名稱(chēng)：2-chloride-5-CAS號(hào)：69045-79-0分子式：239.44分子量：C5H3ClIN枝芽胞桿菌 Virgibacillus sp.

GBC-SD, 人膽囊細(xì)胞

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

拜賴(lài)青霉

人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：U251

PANC-1, 人胰腺細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes

Ca Ski(人宮頸上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

純白鏈霉菌 Streptomyces candidus

人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞英文名稱(chēng)：NCI-H157

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

貝葉多孔菌

丹參酮IIA規(guī)格：1g/支；98%

大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

水螺菌 Aquaspirillum sp.

少根根霉 Rhizopus arrhizus