人鞘磷脂（SM）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human sphingomyelin,SM ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

AK6  P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-cardiac Troponin I(Thr143)  磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

C21ORF62  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體規(guī)格: 0.2ml

C4orf42  4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體規(guī)格: 0.2ml

Snake(Agkistrodonhaly) poison Protein  蛇毒蛋白抗體（蝮蛇）規(guī)格: 0.2ml

TGF beta R2/TGFBR2  轉(zhuǎn)移生因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ）規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Tie2 (Ser1119)  磷酸化管生成素受體2抗體規(guī)格: 0.1ml

CRLF2  胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyhr927)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體規(guī)格: 0.1ml

C5orf51  5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體規(guī)格: 0.2ml

Factor XI  凝因子11抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-PTPN7(Ser93)  磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體規(guī)格: 0.1ml

phgophs-ATG4C(Ser451)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PAK4(Ser474)/PAK5(Ser602)/PAK6(Ser560)  磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體規(guī)格: 0.1ml

RXR Alpha/RXRA/Retinoid X receptor  核受體RXRα抗體規(guī)格: 0.1ml

ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1  管生成素-1抗體規(guī)格: 0.1ml

SRC  src原基因抗體規(guī)格: 0.2ml

CA I/Carbonic anhydrase 1  碳酸酐酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

TUSC1  肺抑蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

COX4/COX IV-1  細(xì)胞色素c氧化酶IV亞型1抗體規(guī)格: 0.2ml

NLRP10  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti

P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

雙孢蘑菇

羊IgG1 ml國(guó)產(chǎn)

小鼠腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

不動(dòng)桿菌 Acinetobacter sp.

EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

平菇 Pleurotus sp.

成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

平菇 Pleurotus sp.

人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法顯影粉10包(10 × 250 ml)國(guó)產(chǎn)

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞

煙草節(jié)桿菌 Arthrobacter nicotianae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

LoVo(人大腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

泡盛曲霉 Aspergillus awamori