人吖啶橙（AO）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人吖啶橙(AO)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Acrine Orange,AO ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人吖啶橙(AO)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
人吖啶橙(AO)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人吖啶橙(AO)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

TBX2/T-box2  新型抑基因抗體規(guī)格: 0.2ml

PTPH1/PTPN3  蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的羊抗人IgM規(guī)格: 1ml

Cyclin F  周期素F抗體規(guī)格: 0.1ml

PRAME  黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-CDKN1A/P21 (Thr145)  磷酸化p21蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

COBLL1  Cordon bleu蛋白樣1抗體規(guī)格: 0.2ml

SIRT6  沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體規(guī)格: 0.2ml

FXR1  脆性X相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor  β3上素能受體抗體規(guī)格: 0.1ml

Brucella  布氏桿菌菌體蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

LIPG/Endothelial lipase  內(nèi)皮脂肪酶抗體規(guī)格: 0.2ml

NDUFAF4  激素調(diào)節(jié)增值細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

APG4B/AUTL1  自噬相關(guān)蛋白4B抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Bio  生物素標(biāo)記的兔抗羊IgM規(guī)格: 0.5ml

PCDHGA2  原鈣粘蛋白γA2抗體規(guī)格: 0.2ml

CDC37  Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體 0.1ml

phospho-HDAC8(Ser39)  磷酸化組蛋白去乙?；?抗體規(guī)格: 0.1ml

RDH13  視黃醇脫氫酶13抗體規(guī)格: 0.2ml

TNFRSF13B  瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體規(guī)格: 0.2ml

p150 CAF1  染色質(zhì)組裝因子1P155抗體規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的小鼠抗兔IgM規(guī)格: 0.1ml

DDX58  DDX58抗體規(guī)格: 0.2ml鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

皺枝孢 Cladosporium delicatulum

家貓肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱：CatL2

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記） Mouse

異常畢赤酵母 Pichia anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

HLF-a(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus

大鼠腎細(xì)胞英文名稱：NRK-52E

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

AM(人腺樣囊性細(xì)胞（高轉(zhuǎn)移）)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-細(xì)胞核-漿蛋白抽提試劑盒50次國(guó)產(chǎn)gersion

人吖啶橙(AO)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

露濕漆斑菌

人結(jié)直腸腺上皮細(xì)胞英文名稱：DLD-1

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

光滑青霉

蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni