人溴脫氧核苷尿嘧啶（BrdU）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

米根霉 Rhizopus oryzae

臭曲霉 Aspergillus foetidus

大鼠嗅鞘細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

MA-891(小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus Plantarum

沼澤紅假單胞菌 Rhodosedoseudomouas padustris

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolescentis

黑曲霉 Aspergillus niger

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

猴菌

球形芽胞桿菌 Bacillus sphaericus

F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

松塔牛肝菌 Strobilomyces strobilaceus

小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：M1

Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞LRRC10  富含亮氨酸重復(fù)蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml

X protein/HB-X (middle)  抗乙肝病毒X蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

LSAMP  大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1  心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 0.2ml

Phospho-HER3 (Tyr1222)  磷酸化HER3受體抗體規(guī)格: 0.1ml

ADAM2  去整合素樣金屬蛋白酶2抗體 0.2ml

Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體規(guī)格: 0.1ml

C1orf187  1號染色體開放閱讀框187抗體規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgM規(guī)格: 0.1ml

CYP27A1  膽固醇27α羥化酶抗體規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/APC  APC標(biāo)記的驢抗兔IgG規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的驢抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml

SIRT1/sirtuin 1  沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml

phospho-APP/ABPP(Thr668)  磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

GP1B/CD42b  小板糖蛋白GPIb抗體規(guī)格: 0.2ml

人溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Integrin alpha 2/CD49b  整合素α2抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-CDK9 (Thr29)  磷酸化周期素依賴性激酶9抗體規(guī)格: 0.1ml

CEBP Beta  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Bio  生物素標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM規(guī)格: 0.3ml