人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78（ENA-78/CXCL5）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

NFKBIB/IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體規(guī)格: 0.2ml

ANGPTL3/ANG5  管生成素樣蛋白3規(guī)格: 0.2ml

phospho-VEGF receptor 2(Tyr1214)  磷酸化管內(nèi)皮生因子受體2抗體規(guī)格: 0.1ml

SH2B1  SH2B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgM規(guī)格: 0.1ml

MUC13  粘蛋白13抗體規(guī)格: 0.2ml

NS5ATP9/KIAA0101  丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體規(guī)格: 0.2ml

PCK1  磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC12  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體規(guī)格: 0.2ml

TGF Beta R3  轉(zhuǎn)移生因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ）規(guī)格: 0.1ml

CCL13/MCP-4  單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-LSP1 (Ser252)  磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

sLOX 1  可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體規(guī)格: 0.2ml

ELF1/E74 like factor 1  轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體規(guī)格: 0.2ml

DEDD2  死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

CARD14  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596)  磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體規(guī)格: 0.1ml

ETK/BMX  非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體規(guī)格: 0.1ml

Acetyl-Histone H4(K8)  乙?；M蛋白H4抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-HDAC6 (Ser22)  磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體規(guī)格: 0.1ml

HSP90 alpha  熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體規(guī)格: 0.2ml

IDE  胰島素降解酶抗體規(guī)格: 0.2ml

CD98  CD98重鏈抗原抗體規(guī)格: 0.1ml泡盛曲霉 Aspergillus awamori

酸鏈球菌 Lactococcus lactis

HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑曲霉 Aspergillus niger

大鼠腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii

小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：MLTC-1

T24, 人膀胱細(xì)胞

Bacterial Protein Extraction Reagent/細(xì)菌蛋白抽提試劑25次、100次國產(chǎn)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

五通橋毛霉 Mucor wutungkiao

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Caki-1, 人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Human

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

新月彎孢霉 Curvularia lunata

人參刺盤孢 Colletotrichum panacicola

考馬斯亮藍(lán)R-25010g國產(chǎn)

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse