人維生素D3（VD3）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人維生素D3(VD3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Vitamin D3,VD3 ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人維生素D3(VD3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
人維生素D3(VD3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人維生素D3(VD3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

TSP-1/THBS1  小板反應(yīng)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
ELAC2  遺傳性前列蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗親和素規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml
C3orf33  3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-AP2M1 (Thr156)  磷酸化接相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-HOMER3(Thr36)  磷酸化HOMER3蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Bax  Bax規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Bcl-2(Thr129)  磷酸化Bcl-2抗體規(guī)格: 0.1ml
Dog IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Bio  生物素標(biāo)記的羊抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/APC  APC標(biāo)記的羊抗雞IgG規(guī)格: 0.1ml
MLF1/2/3  髓細(xì)胞性白病蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
C11ORF67/PTD015  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體規(guī)格: 0.2ml釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
龜裂鏈霉菌 Bacillus mucilaginosus
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki
小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
香菇屬 Lentinula sp.
香菇 Lentinula edodes
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系
藤黃節(jié)桿菌 Arthrobacter luteus
苜蓿中華根瘤菌
RBE, 人肝膽管細(xì)胞gersion
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
大麗輪枝孢 Verticillium dahliae
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MDA-MB-175VII(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus
小鼠肝細(xì)胞英文名稱：Hepa 1-6
大鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
污泥枝動(dòng)菌 Mycoplana peli
雙氮纖維單胞菌 Cellulomonas biazotea
人維生素D3(VD3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 HT-29, 人結(jié)腸細(xì)胞
AQP3  水通道蛋白-3抗體規(guī)格: 0.1ml
KIF5A/NKHC1  驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5A抗體規(guī)格: 0.2ml
GJC2/Connexin 47  間隙連接蛋白47抗體規(guī)格: 0.2ml
TRADD  瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Transferrin(1F10)  轉(zhuǎn)鐵蛋白單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml
CD19  CD19抗體規(guī)格: 0.1ml
CLEC2D/OCIL  CLEC2D蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml