人凝血酶原（PT）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱(chēng)：Human Prothrombin,PT ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱(chēng)：Human Prothrombin,PT ELISA Kit    
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱(chēng)取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商， 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

ER-beta  雌激素受體β 抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgG規(guī)格: 0.1ml

ABHD5  自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 0.2ml

CD133  造干細(xì)胞抗原CD133抗體 0.1ml

Calpain 1  鈣蛋白酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

TROP2/TACD2  細(xì)胞表面糖蛋白Trop2抗體（胰標(biāo)志物蛋白）規(guī)格: 0.1ml

phospho-KLF5(Ser272)  磷酸化KLF5抗體規(guī)格: 0.1ml

UBAP1  泛素相關(guān)蛋白1抗體（鼻咽相關(guān)基因20蛋白）規(guī)格: 0.2ml

NTCP/SLC10A1  鈉離子/?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白規(guī)格: 0.1ml

C20orf160  20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框160抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml

APBB1/Fe65 protein  鐵蛋白Fe65抗體規(guī)格: 0.1ml

Reg3 beta  胰島β細(xì)胞生因子Reg IIIα 抗體規(guī)格: 0.2ml

IKK beta/IKB  KB抑制蛋白激酶β抗體規(guī)格: 0.1ml

GLB1L3  β半糖苷酶1樣蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)  磷酸化管內(nèi)皮生因子受體2抗體規(guī)格: 0.1ml

KLHDC9  KLHDC9蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgM規(guī)格: 2ml

EGF  表皮生因子抗體（大鼠）規(guī)格: 0.1ml

DAP3  死亡相關(guān)蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

PIWIL1/Miwi  piwi樣1蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CKLFH8/CMTM8  趨化素樣因子超家族成員8抗體規(guī)格: 0.2ml

TGF Beta R1/TGFBR1  轉(zhuǎn)移生因子β受體1抗體（TGF-βRⅠ）規(guī)格: 0.2ml

CCL11/Eotaxin 1  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

PRUNE/DRES17  相關(guān)蛋白DRES17抗體規(guī)格: 0.2ml

L-enk  亮氨酸腦啡肽抗體規(guī)格: 0.1ml CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

嗜熱假諾卡氏菌 Pseudonocardia thermophila

Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml、500ml100ml、500ml

暫無(wú) Microbacterium ammoniaphilum

漏斗狀側(cè)耳 Pleurotus sajor-caju

神經(jīng)母細(xì)胞瘤英文名稱(chēng)：LAN-6

香菇 Lentinula edodes

COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopocus

人胚肺成纖維樣細(xì)胞（男）英文名稱(chēng)：HEL1

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

鏈霉菌 Streptomyces sp.

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒規(guī)格：20次

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

平沙綠僵菌 Metarhizium pingshaense

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株 Human

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

球毛殼菌 Chaetomium globosum

人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 黃芪甲苷規(guī)格：100mg/支；98%

人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝 Human

異常畢赤酵母 Pichia anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

Kidins220  220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml