人血小板相關免疫球蛋白（PAIg）elisa試劑盒操作步驟

人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Human plaet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題，收貨后十五個工作日內包退換。 
英文名稱：Human plaet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

UAP56/BAT1  ATP-依賴的RNA解旋酶p47抗體規(guī)格: 0.1ml

CD45RO  CD45RO抗體規(guī)格: 0.1ml

SIPA1  信號誘導增相關蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Cytomegalovirus pp65   巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CD54/ICAM-1  細胞間粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml

PEDF/SERPINF1  色素上皮源性因子抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-AQP2(Ser264)  磷酸化水通道蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的驢抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml

GM-CSF  粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗體規(guī)格: 0.1ml

Calponin 1/2/3  鈣結合蛋白Calponin抗體規(guī)格: 0.2ml

Kv1.3/PCN3  離子通道蛋白Kv1.3抗體規(guī)格: 0.2ml

PDXK  吡哆醛激酶抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的羊抗小鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

phospho-Cortactin (Tyr466)  磷酸化皮層肌動蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗猴IgM規(guī)格: 0.1ml

FGL2  凝酶原酶(纖維介素)抗體規(guī)格: 0.2ml

SnoN  Smad核轉錄共抑制因子抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-GATA1(ser310)  磷酸化珠蛋白轉錄因子1抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

RASGEF1A  鳥嘌呤核苷酸交換因子rasgef1a抗體規(guī)格: 0.2ml

RAB20  ras基因家族RAB20抗體規(guī)格: 0.2ml

Oncostatin M  基因蛋白抑瘤素M抗體規(guī)格: 0.2ml

NANOS2  生細胞增相關蛋白NANOS2抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Dab1 (Tyr232)  磷酸化Disabled 1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-p56Dok2(Tyr299)  磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

RKO(人結腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

根瘤菌

TSCCa(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2

溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus

裂褶菌

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

HCCC-9810(人肝內膽管細胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌 Lactococcus lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

SDS-PAGE Loading Buffer (還原，5x)10ml國產

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti

One StepWestern Kit AP(Rabbit)/一步法快速WB(AP)試劑盒(兔)2次2次、10次、50次gersion

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

大球蓋菇 Stropharia rugoso-annulata

小鼠白血病細胞英文名稱：L1210

Caco-2，人結直腸腺細胞

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

大豆慢生根人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)elisa試劑盒操作步驟 瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

ME-180(人子宮頸表皮細胞)5×106cells/瓶×2

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

phospho-ITGB4(Tyr1526)  磷酸化整合素β4抗體規(guī)格: 0.1ml