詳細(xì)介紹
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
桿菌屬 Lactobacillus sp.
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
戴爾根霉
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
蘇云金芽胞桿菌達(dá)爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
白盤孢 Gloeosporium album
綠色木霉 Trichoderma viride
胰腺腺泡細(xì)胞英文名稱:MPC-83
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
人腺細(xì)胞英文名稱:Hs 578T
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
黑曲霉 Aspergillus niger
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
假單胞菌 Pseudomonas sp.
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
桿菌屬 Lactobacillus sp. Norfluoxetine (5 mg)Desmethylfluoxetine; γ-[4-(trifluoromethyl)phenoxy]-benzenepropanamine
Alprenolol (hydrochloride) (25 mg)H 56/28; 1-[(1-methylethyl)amino]-3-[2-(2-propen-1-yl)phenoxy]-2-propanol, monohydrochloride
Corticosterone (500 mg)11β,21-DHP|11β,21-dihydroxy Progesterone|17-deoxy Cortisol|NSC 9705; 11β,21-dihydroxy-pregn-4-ene-3,20-dione
Tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline)ruthenium II dichloride complex (5 mg)Ru(ddp); (OC-6-11)-tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline-κN1,κN10)-ruthenium(2+), dichloride
LY411575 (1 mg)N-[(1S)-2-[[(7S)-6,7-dihydro-5-methyl-6-oxo-5H-dibenz[b,d]azepin-7-yl]amino]-1-methyl-2-oxoethyl]-3,5-difluoro-αS-hydroxy-benzeneacetamide
BIX02188 (25 mg)(3Z)
GIT 27 (10 mg)VGX-1027; 4,
AB-CHMINACA metabolite M5A (10 mg)1-((4-hydroxycyclohexyl)methyl)-1H-indazole-3-carboxylic acid
Promethazine (hydrochloride) (10 g)Diprazin|Fellozine|Lergigan|Phenergan|Romergan; N,N,α-trimethyl-10H-phenothiazine-10-ethanamine, monohydrochloride
BVT 948 (5 mg)4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5(3H)-dione
CEP-33779N-[3-(4-methyl-1-piperazinyl)phenyl]-8-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridin-2-amine
Clinafloxacin (hydrochloride) (250 mg)AM1091; 7-(3-ami-pyrrolidinyl)-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
Eicosapentaenoic Acid ethyl ester-d5 (500 ug)EPA ethyl ester-d5; 5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid, ethyl ester-d5
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Difenoxin (hydrochloride) (1 mg)Diphenoxylic Acid|R 15403; 1-(3-cyano-3,3-diphenylpropyl)-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
BB-22 RM (5 mg)QUCHIC; 1-(cyclohexylmethyl)-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid