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小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟

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更新時(shí)間:2017-03-15 12:31:05瀏覽次數(shù):265

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟含量。

詳細(xì)介紹

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Mouse anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri

枝芽胞桿菌 Virgibacillus sp.

SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)

黑曲霉 Aspergillus niger

猴菌

Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)500ml100ml、500ml

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki

日本根霉 Rhizopus japonicus

肺腺英文名稱:GLC-82

屎腸球菌 Enterococcus faecium

A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

赭曲霉 Aspergillus ochraceus

kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

麥角甾苷規(guī)格:20mg/支;98%

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

局限青霉 Penicillium resteictum DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 3.5 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 3.5 kDa

17-phenyl trinor 8-iso Prostaglandin E2 (25 mg)17-phenyl trinor 8-iso Prostaglandin E2, 9-oxo-11.alpha.,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,2-trinor-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid

15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin A1 (50 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGA1, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin A1, 9-oxo-prosta-1,12Z,14E-trien-1-oic acid

KN-93 (25 mg)KN-93, N-[2-[[[3-(4-chlorophenyl)-2-propen-1-yl]methylamino]methyl]phenyl]-N-(2-hydroxyethyl)-4-methoxy-benzenesulfonamide

Petromyzonol EIA Antiserum (500 dtn)Petromyzonol EIA Antiserum

(S)-(-)-Linoleyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide (10 mg)(S)-(-)-Linoleyl-1 -Hydroxy-2 -Propylamide, N-((S)-1-hydroxypropan-2-yl)octadeca-9Z,12Z-dienamide

硝銨(5KG)Ammonium Nitrate, CAS# 6484-52-2; ≥98%; HAZARDOUS MATERIAL

L-谷胱甘肽(25GM)L-Glutamine, CAS# 56-85-9; MW 146.14; C5H10N2O3; USP Grade; Endotoxin and cell culture tested.

無水磷氫二鈉(1KG)Sodium Phosphate, Dibasic, Anhydrous, ACS Grade; Cas# 7558-79-4; Formula: Na2HPO4; Formula Weight: 141.96

青鏈霉素溶液(100X)(6X100ML)Penicillin-Streptomycin Solution (100X), Contains 10,000 U/ml of penicillin, 10,000 ug/ml streptomycin and 29.2 mg/ml L-glutamine in a 0.9% saline sterile-filtered solution.

5-ROX[5-羧基-X-羅丹明琥珀酰亞胺酯] 單體5-ROX, SE [5-Carboxy-X-rhodamine, succinimidyl ester] Single isomer

PerCP(多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質(zhì) 復(fù)合物)PerCP (Peridinin-Chlorophyll-Protein Complex)

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒操作步驟 胰凝乳蛋白酶熒光底物MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMCMeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC

新型鈣離子熒光探針Quest Fluo-8H, AMQuest Fluo-8H, AM

6-HEX, SE [6-Carboxy-2’,4,4’,5’,7,7’-hexachlorofluorescein,琥珀酰SE] 單體6-HEX, SE [6-Carboxy-2’,4,4’,5’,7,7’-hexachlorofluorescein, succinimidyl ester] Single Isomer

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