詳細(xì)介紹
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
屎腸球菌 Enterococcus faecium
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)10mL
尖孢鐮刀菌棉花?;?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
曲霉屬 Aspergillus sp.
指狀青霉 Penicillium digitatum
HNE2, 人鼻咽細(xì)胞系
HUM, 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞
香菇 Lentinula edodes
泛酸枝芽胞桿菌 Virgibacillus pantothenticus
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
桿菌屬 Lactobacillus sp.
惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida
人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大豆慢生根瘤菌
Saos-2(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中性紅染色液規(guī)格:100ml
新型鈣離子熒光探針Quest Fluo-8, 鈉鹽Quest Fluo-8, sodium salt
羅丹明101 內(nèi)鹽 熒光標(biāo)準(zhǔn)品Rhodamine 101 Inner Salt Fluorescence reference standard
Fluorescein-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液(pH 7。5)Fluorescein-dUTP 1 mM in Tris Buffer (pH 7。5)
Cyanine 3。5, 單琥珀酰亞胺脂 [相當(dāng)于Cy3。5 NHS脂]Cyanine 3。5, monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy3。5 NHS ester]
吲哚青綠ICG-OSu
2C-T-4 (hydrochloride) (10 mg)2,5-dimethoxy-4-[(1-methylethyl)thio]-benzeneethanamine, monohydrochloride; 2,5-dimethoxy-4-isopropylthiophenethylamine; 2C-T-4 (hydrochloride)
AH 7921 (1 mg)3,4-dichloro-N-[[1-(dimethylamino)cyclohexyl]methyl]-benzamide; AH 7921
2-methyl Benzamideoxime (1 g)(Z)-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide; 2-methyl Benzamideoxime
N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone (50 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-hexadec*; N-palmitoyl-L-Homoserine|C16-HSL; N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone
CAY10603 (10 mg)N-[4-[3-[[[7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl]amino]carbonyl]-5-isoxazolyl]phenyl]-1,1-dimethylethyl ester, carbamic acid; CAY10603
(-)-CP 47,497 (solution) (10 mg)2[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)phenol; (-)-CP 47,497 (solution)
FK-866 (50 mg)N-[4-(1-benzoyl-4-piperidinyl)butyl]-3-(3-pyridinyl)-2E-propenamide; K 22。175; FK-866
SQ 22,536 (5 mg)9-(tetrahydro-2-furanyl)-9H-purin-6-amine; NSC 53339; SQ 22,536
Apelin-13 (5 mg)L-glutaminyl-L-arginyl-L-prolyl-L-arginyl-L-leucyl-L-seryl-L-histidyl-L-lysylglycyl-L-prolyl-L-methionyl-L-prolyl-L-phenylalanine; Apelin-13
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法NC0224 (10 mg)7-[3-(dimethylamino)propoxy]-2-(hexahydro-4-methyl-1H-1,4-diazepin-1-yl)-6-methoxy-N-(1-methyl-4-piperidinyl)-4-quinazolinamine; UNC0224
16,16-dimethyl Prostaglandin E1 (100 mg)9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl PGE1; 16,16-dimethyl Prostaglandin E1
JWH 193 (10 mg)(4-methyl-1-naphthalenyl)[1-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1H-indol-3-yl]-methanone; JWH 193