小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）elisa試劑盒操作步驟

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

根瘤菌 Rhizobium sp.

膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

人支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia coralline

果香地霉

TE-11(人食管細胞)5×106cells/瓶×2

A-427(人肺細胞)5×106cells/瓶×2

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱：3T3A31

Caki-2(人腎透細胞細胞)5×106cells/瓶×2

爪哇正青霉 Eupenicillium javanicum

灰色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces griseochromogenes

NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細胞)5×106cells/瓶×2

狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum

出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

尖孢鐮刀菌棉花?；?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

鏈球菌 Lactococcus lactis

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

紅曲霉 Monascus anka

猴菌

樹狀假絲酵母 Candida cerevisiae

香菇 Lentinula edodes

木霉Carboxytetramethylrhodamine， succinimidyl ester] Validated for labeling oligos

臺盼紫 0。1M水溶液Trypan Purple 0。1 M aqueous solution

酪蛋白，TAMRA標記Casein， TAMRA-conjugated

鈣離子熒光探針Rhod-5N，三鉀鹽Rhod-5N， tripotassium salt

6-HEX氨基磷酯[5’-六氯熒光素氨基磷酯]6-HEX phosphoramidite [5’-Hexachlorofluorescein phosphoramidite]

iFluor 647-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Cyanine 3疊氮化物 [相當于Cy3疊氮化物]Cyanine 3 azide [equivalent to Cy3 azide]

ICG-Sulfo-EG8-OSuICG-Sulfo-EG8-OSu

2C-N （5 mg）2，5-dimethoxy-4-nitro-benzeneethanamine； 2，5-Dimethoxy-4-nitrophenethylamine； 2C-N

BI6015 （5 mg）2-methyl-1-[（2-methyl-5-nitrophenyl）sulfonyl]-1H-benzimidazole； BI6015

Prostaglandin D3 （1 mg）9。alpha。，15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5Z，13E，17Z-trien-1-oic acid； PGD3； Prostaglandin D3

N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone （25 mg）3-oxo-N-[（3S）-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-tetradec*； 3-oxo-C14-HSL|N-3-oxo-myristoyl-L-Homoserine lactone； N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone

AGK2 （1 mg）2-cyano-3-[5-（2，5-dichlorophenyl）-2-furanyl]-N-5-quinolinyl-2-propenamide； AGK2

Pimelic Diphenylamide 106 （5 mg）N1-（2-aminophenyl）-N7-（4-methylphenyl）-heptanediamide； TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII； Pimelic Diphenylamide 106

Cannabidiol dimethyl ether （5 mg）1，3-dimethoxy-2-[（1R，6R）-3-methyl-6-（1-methylethenyl）-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-benzene； Cannabidiol-2’，6’-dimethyl ether|CBDD； Cannabidiol dimethyl ether

SU 6656 （10 mg）2，3-dihydro-N，N-dimethyl-2-oxo-3-[（4，5，6，7-tetrahydro-1H-indol-2-yl）methylene]-1H-indole-5-sulfonamide； SU 6656

Oxalomalic Acid （sodium salt） （25 mg）3-carboxy-3-deoxy-2-pentulosaric acid， trisodium salt； Oxalomalic Acid （sodium salt）

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟13，14-dihydro-15（R）-Prostaglandin E1 （1 mg）9-oxo-11。alpha。，15R-dihydroxy-prostan-1-oic acid； 13，14-dihydro-15（R）-PGE1； 13，14-dihydro-15（R）-Prostaglandin E1

CAY10408 （10 mg）9-oxo-11。alpha。，16R-dihydroxy-17-cyclobutyl-5Z，13E-dien-1-oic acid； CAY10408

JWH 149 （10 mg）（4-methyl-1-naphthalenyl）（2-methyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 149