化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
BLOTTO全名是Bovine Lacto TransferTechnique Optimizer，是一種含有脫脂奶粉、磷酸鹽和抗菌劑的雜交阻斷劑，可以用于DNA雜交(Southern雜交、斑點(diǎn)雜交、菌落雜交)、Western雜交、ELISA；但不能用于RNA雜交和低拷貝的Southern雜交。也不能與含高濃度的SDS混用。 儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸、-4℃保存(不能保存在-20℃)，有效期一年。 本試劑盒是基于毛細(xì)管轉(zhuǎn)膜法的Southern和Northern印跡膜制備試劑，專門用于從電泳得到的凝膠中制備用于Southern雜交和Northern雜交的印跡膜。 產(chǎn)品特點(diǎn)： 1.即開即用，提供制備5張13×20cm大小的Southern雜交和Northern雜交印跡膜所需要的印跡膜和溶液，不需要用戶單獨(dú)準(zhǔn)備。 2.快速：轉(zhuǎn)膜過程只需要1小時(shí)，整個(gè)過程只需要2.5小時(shí)(對(duì)DNA)或1.5小時(shí)(對(duì)RNA)。 3.跟硝酸纖維素膜、帶電尼龍膜、中性尼龍膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。 4.A型提供硝酸纖維素膜，適用于400bp以上的靶分子，背景低。B型提供帶電尼龍膜，適用于40bp以上的靶分子，結(jié)合力強(qiáng)。如需中性尼龍膜或PVDF膜，需另購。 5.使用優(yōu)化的下向轉(zhuǎn)膜法，不但效率比上行轉(zhuǎn)膜法高30%左右，而且條帶彌散度低、分辨率高。 可用瓊脂糖膠(包括脈沖電泳膠，DNA電泳、RNA甲醛膠電泳和RNA戊二醛電泳)和DNA PAGE膠。 儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
BLOTTO Solution | 250mL | GOY-F10162 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit 5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 73616-27-0 中文名： 分子式：C5H9N3O 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔內(nèi)皮素-1(rabbit ET-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 25961-11-9 中文名： 分子式：C16H14ClNO 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔內(nèi)皮素（Endothelin-1）ELISA試劑盒 5-Amino-2-methylindole 中文名：5-氨基-2-甲基吲哚 分子式：C9H10N2
兔內(nèi)皮素 英文名稱： Rabbit Endothelin 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ET-1 Pemetrexed 137281-23-3 中文名：培美曲塞二鈉 分子式：C20H21N5O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔內(nèi)啡肽-b(rabbit Endorphin-b) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Amino-2-methylindole 7570-49-2 中文名：5-氨基-2-甲基吲哚 分子式：C9H10N2
硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) Methyl Stearate 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 大鼠組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHistamine,HISELISAKit 96T/48T
亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) Methyl Linolenate 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 人蛋白酶體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)試劑盒 Human PSMB1 ELISA kit
亞油酸甲酯(>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) Methyl Linoleate 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1-十一烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Undecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Gamborg’sB5*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
1-十二烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Dodecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) MouseSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISA試劑盒小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1-十三烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Tridecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)Elisa 試劑盒
1-十四烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Tetradecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Rat macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
1-十五烯(>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Pentadecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Humanai-Reticulinaibody,ARAELISAKit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
1-十六烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Hexadecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Humanalcoholdehydrogenase,ADHELISA試劑盒人乙脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1-十七烯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 1-Heptadecene 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
BLOTTO溶液組織NEK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞NEK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織MSK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞MSK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織MSK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
化工儀器網(wǎng)