詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本品為iFluor 555標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,可發(fā)出橘紅色的熒光,具有的高亮度和光穩(wěn)定性,且染色反應(yīng)特異性強,對比性高,具有比Actin抗體更好的染色效果,適合用作F-actin的定性和定量檢測。iFluor 555 鬼筆環(huán)肽染色與用于細(xì)胞分析的其他熒光染色*兼容,包括熒光蛋白、納米晶體和其他iFluor偶聯(lián)物(包含iFluor偶聯(lián)二抗)。另外,經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性,適用性廣泛。本品以1000×儲存液形式(溶于DMSO)提供。 鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)的環(huán)狀七肽毒素,以高親和力(Kd= 20 nM)選擇性結(jié)合于絲狀肌動蛋白F-actin,而不會與單體肌動蛋白G-actin結(jié)合,通常用來標(biāo)記組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系中的F-actin,從而對F-actin進行定性和定量分析。另外,鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維,無論是動植物來源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞,按照每一個肌動蛋白亞基約與一個鬼筆環(huán)肽分子的計量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略,染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識度非常明顯。因此,鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動蛋白(Actin)抗體進行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小,直徑約12-15?,分子量<2000 Daltons,未標(biāo)記肌動蛋白(Actin)的許多生理特性都得以維持,比如,同肌動蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng);鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì);以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。 鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動蛋白(微絲)的解離,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態(tài)平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1μg/mL,因此,可用作一種聚合促進劑。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。 分子量:~1300 大激發(fā)/發(fā)射波長:556/574nm 溶解性:溶于DMSO 儲存條件:-20℃避光干燥,有效期一年 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
iFluor 555 phalloidin | 300T | GOY-F10203 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
酸性成纖維生長因子 英文名稱: acid fibroblast growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: a-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O 度:98.0%
酸性0酸酶(ACP)檢測 Prostate acid enzyme (PACP) detection Polypodine B 18069-14-2 中文名:水龍骨甾酮B 分子式:C27H44O8 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 昆蟲蛻皮激素活性; 歐亞水龍骨; 蛻化類固; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
酸性0酸酶(ACP)測定試劑盒(微板法) Repaglinide ethyl ester 中文名: 分子式:C29H40N2O4
酸性0酸酶(ACP)測定試劑盒(微板法) Repaglinide 中文名: 分子式:Repaglinide
素 英文名稱: Human Renin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: RN 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
DL-賴 DL-Lysine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ratProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit大鼠前列E1(PGE1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-精鹽酸鹽 DL-Arginine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR HelicobacterpyloriRFLP基因分析試劑盒20
左旋肉堿;BT;左卡尼汀 L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
左卡尼汀;左旋肉堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Levocarnitine;L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 ,英文名: ssDNA ELISA Kit
L-谷鈉,一水 L-Glutamic acid mono salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測試劑盒Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
L-(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgM)ELISA kit
(還原型) Glutathione (Reduced);GSH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列E2(PGE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-(標(biāo)準(zhǔn)品) Glutathione (Reduced) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型 Helly固著液50毫升
(氧化型) Glutathione(Oxidized) 質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-異亮 DL-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
iFluor 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-9)明膠法比色定量檢測試劑盒
體液基質(zhì)金屬(MMP-2)明膠法比色定量檢測試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP-2)明膠法比色定量檢測試劑盒
細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-2)明膠法比色定量檢測試劑盒
基質(zhì)金屬抑制劑(TIMP1/2/3)逆相明膠酶譜法(reverse gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(不含標(biāo)準(zhǔn)樣)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。