大鼠細胞周期素D3（Cyclin-D3）elisa試劑盒實驗方法

大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Rat Cyclin-D3 ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱： Rat Cyclin-D3 ELISA Kit  
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

Phospho-Beta-Catenin (Ser552)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體  規(guī)格:   0.1ml

PRDM1/Blimp1  B淋巴細胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體   規(guī)格:   0.2ml

ABI3BP  ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體   規(guī)格:   0.2ml

CHX10  CHX10蛋白抗體    規(guī)格:   0.1ml

FOXC1/FREAC3  叉相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體  規(guī)格:   0.1ml

Ezrin  埃茲蛋白抗體 規(guī)格:   0.1ml

phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體  規(guī)格:   0.1ml

phospho-FANCD2(Ser222)  磷酸化FANCD2抗體   規(guī)格:   0.1ml

Phospho-FoxO1 (Ser256)  磷酸化叉蛋白家族1抗體  規(guī)格:   0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的驢抗人IgG   規(guī)格:   0.5ml

LRPAP1/MRAP  脂蛋白受體相關(guān)蛋白抗體（低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1）  規(guī)格:   0.1ml

MTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor  管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格:   0.1ml

phospho-LSP1 (Ser204)  磷酸化白細胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體   規(guī)格:   0.1ml

THRA1+2  甲狀激素受體α1+α2抗體    規(guī)格:   0.2ml

DACH2  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體   規(guī)格:   0.2ml

OSGIN1  氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生抑制因子1抗體    規(guī)格:   0.2ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG    規(guī)格:   0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1092)  磷酸化表皮生因子受體抗體    規(guī)格:   0.1ml

Insulin Receptor R  胰島素受體相關(guān)受體抗體  規(guī)格:   0.2ml

phospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體   規(guī)格:   0.1ml

Alpha s2 Casein  α-s2酪蛋白抗體    規(guī)格:   0.2ml

Phospho-TIF1 beta(Ser824)  磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 規(guī)格:   0.1ml

Phospho-HP1 gamma (Ser93)  磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 規(guī)格:   0.1ml

H3-K4-HMTase SETD7  組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體  規(guī)格:   0.2ml (S)-3-羥基四氫呋喃英文名(EN)：(S)-3-Hydroxytetrahydrofuran,99%CAS No.：86087-23-2規(guī)格(SP)：1G類別(Key)：通用試劑

3-羥基四氫呋喃英文名(EN)：3-Hydroxytetrahydrofuran,98%CAS No.：453-20-3規(guī)格(SP)：5G類別(Key)：通用試劑

2,3-二氫-5-醛基-1-...英文名(EN)：5-Coumarancarboxaldehyde,97%CAS No.：55745-70-5規(guī)格(SP)：1G類別(Key)：通用試劑

2-戊基呋喃英文名(EN)：2-Pentylfuran,≥97%CAS No.：3777-69-3規(guī)格(SP)：10G類別(Key)：通用試劑

2--3-硫基呋喃英文名(EN)：2-Methyl-3-(methylthio)furan,≥98%CAS No.：63012-97-5規(guī)格(SP)：5G類別(Key)：通用試劑

2--3-呋喃硫醇英文名(EN)：2-Methyl-3-furanthiol,95%CAS No.：28588-74-1規(guī)格(SP)：250MG類別(Key)：通用試劑

2-羥-3,4-二氫...英文名(EN)：3,4-Dihydro-2H-pyran-2-methanol,≥98.5%CAS No.：3749-36-8規(guī)格(SP)：1ML類別(Key)：通用試劑

2,5-二氫呋喃英文名(EN)：2,5-Dihydrofuran,97%CAS No.：1708-29-8規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：通用試劑

苯并呋喃英文名(EN)：2,3-Benzofuran,99%CAS No.：271-89-6規(guī)格(SP)：5G類別(Key)：通用試劑

2,3-二氫呋喃英文名(EN)：2,3-Dihydrofuran,99%CAS No.：1191-99-7規(guī)格(SP)：25ML類別(Key)：通用試劑

大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實驗方法3,4-二氫-2H-吡喃英文名(EN)：3,4-Dihydro-2H-pyran,97%CAS No.：110-87-2規(guī)格(SP)：100ML類別(Key)：通用試劑

2,5-二呋喃英文名(EN)：2,5-Dimethylfuran,99%CAS No.：625-86-5規(guī)格(SP)：25ML類別(Key)：通用試劑

2,5-二氧基四氫呋喃英文名(EN)：2,5-Dimethoxytetrahydrofuran,98%CAS No.：696-59-3規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：通用試劑