植物全磷可見分光光度法測(cè)試盒 返回列表頁

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產(chǎn)品名稱：植物全磷可見分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100T
測(cè)試方法: 可見分光光度法
貨號(hào)：GOY-01S6797
分類：離子系列
商品介紹：
磷的存在形態(tài)包括無機(jī)磷與有機(jī)磷。無機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過測(cè)定總磷與無機(jī)磷含量即可了解作物對(duì)磷的利用率，進(jìn)而為合理施肥提供依據(jù)。

 測(cè)定原理：

植株樣品用硫酸-過氧化氫消化，使各種形態(tài)磷轉(zhuǎn)變成正磷酸鹽，正磷酸鹽與鉬銻抗顯色劑反應(yīng)，磷鉬藍(lán)，藍(lán)色溶液的吸光度與含磷量呈正比例關(guān)系，用酶標(biāo)儀測(cè)定。

自備儀器和用品：

石墨消解儀、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
腦特定蛋白Brn3B抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2抗體

Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1抗體

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體抗體

骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體

紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體
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植物全磷可見分光光度法測(cè)試盒Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )10L  JM110 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL

Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L  JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10

Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L  JC-11mg

Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )50L  JC-105mg

一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次  IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。