游離膽固醇（FC）微量法測試盒

游離膽固醇（FC）微量法測試盒公司各類熱銷產(chǎn)品FITC標(biāo)記的自噬相關(guān)蛋白16A抗體
FITC標(biāo)記的自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體
FITC標(biāo)記的醛縮酶A抗體
FITC標(biāo)記的甲胎蛋白單克隆抗體（包被）
FITC標(biāo)記的ATP結(jié)合蛋白家族5抗體

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱：游離膽固醇（FC）微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6644
分類：脂肪酸代謝系列
商品介紹：
膽固醇廣泛存在于動物體內(nèi)，尤以腦及神經(jīng)組織中最為豐富，在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也高。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細胞膜的主要成分，其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。動脈粥樣硬化、靜脈血栓形成與膽石癥與高膽固醇血癥有密切的相關(guān)性。

測定原理

游離膽固醇在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，經(jīng)過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物，其顏色深淺與FC含量成正比。

自備用品

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
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游離膽固醇（FC）微量法測試盒大提柱式真菌 RNAout5次  柱式鼠尾 DNAout50 次

細菌 RNAout100 次  柱式拭子 DNAout50 次

細菌 RNAout250 次  柱式石蠟包埋組織 DNAout30 次

葡萄球菌 RNAout50 次  柱式石蠟包埋組織 DNAout2.0（二代測序?qū)Ｓ茫?/span>50 次

分枝桿菌 RNAout50 次  柱式軟體動物 DNAout50 次
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。