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RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-02 13:17:05瀏覽次數(shù):188

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D36 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant RIO Kinase 1 (RIOK1)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人Apelin 13(APLN13)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL人載脂蛋白C3(Apo-C3)ELISA試劑盒96T 2.35-150 ng/mL人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)  產(chǎn)品名稱:過氧化酶1(GPX1)重組蛋白物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

英文名稱:Recombinant Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)  產(chǎn)品名稱:過氧化酶1(GPX1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Lactoperoxidase (LPO)  產(chǎn)品名稱:乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

英文名稱:Recombinant Lactoperoxidase (LPO)  產(chǎn)品名稱:乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種:Capra hircus; Caprine (Goat,山羊)

英文名稱:Recombinant Lactoperoxidase (LPO)  產(chǎn)品名稱:乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Lactoperoxidase (LPO)  產(chǎn)品名稱:乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D36

 

 

產(chǎn)品名稱:RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant RIO Kinase 1 (RIOK1)

RRP10; Serine/threonine-protein kinase RIO1

型號(hào):GOY-01D36

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測分子量:38.5kDa

實(shí)際分子量:39kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Thr180~Val479 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

核突觸蛋白α抗體 Alpha-Synuclein

抑制蛋白激酶C底物抗體 AKAP12

自噬相關(guān)蛋白4B抗體 APG4B

整合素樣金屬與1型-12抗體 ADAMTS12

α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體 alpha Actinin 4-Loading Control

堿性磷酸酶抗體 Alkaline Phosphatase

AU1 tag標(biāo)簽抗體 AU1 tag

脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 AEBP1

蛋白激酶B AKT1

血管生成素樣蛋白2抗體 ANGL2

蛋白激酶B AKT1

血管生成素3/血管生成素4抗體 Angiopoietin 4

RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白人密蘇里游動(dòng)放線菌 Actinoplanes missourieneisMolt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)

人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosqrum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporvia

人肺腺細(xì)胞Protein A Affinity MagBeads/Protein A 磁性親和純化介質(zhì)

香菇 Lentinula edodes密蘇里游動(dòng)放線菌 Actinoplanes missourieneis

黑木耳 Auricularia auricula豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

泡盛曲霉 Aspergillus awamoriNCI-H292(人肺細(xì)胞)

定影粉隱藏正青霉 Eupenicillium cryptum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中華根瘤菌

hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

香菇 Lentinula edodesHuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae變黃羅倫隱球酵母 Cryptococcus laurentii

 


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