詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
弗林蛋白酶(FUR)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1084 |
英文名稱:Recombinant Furin (FUR)
PACE; PCSK3; SPC1; Paired Basic Amino Acid Cleaving Enzyme; Dibasic-processing enzyme
型號:GOY-01D1084
酶與激酶
代謝通路
血液病學
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜, 分泌
預測分子量:18.9kDa
實際分子量:19kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Arg418~Thr573 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:6.4
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:異戊二烯基二磷酸合酶1(GGPS1)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Geranylgeranyl Diphosphate Synthase 1 (GGPS1)
產(chǎn)品名稱:胍乙酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GAMT)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Guanidinoacetate-N-Methyltransferase (GAMT)
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶2β(PYK2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Protein Tyrosine Kinase 2 Beta (PYK2)
產(chǎn)品名稱:氨基乙二酸半醛合酶(AASS)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Aminoadipate Semialdehyde Synthase (AASS)
產(chǎn)品名稱:葡萄糖磷酸變位酶1(PGM1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Phosphoglucomutase 1 (PGM1)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
受體相互作用蛋白激酶1抗體 RIP1
再生基因蛋白4抗體 REG4
RB1的誘導卷曲蛋白RB1CC1抗體 RB1CC1
環(huán)指蛋白211抗體 RNF211
腎素結(jié)合蛋白抗體 RENBP
RET指蛋白樣2/3抗體 RFPL2+RFPL3
RFESD蛋白抗體 RFESD
胰島細胞再生因子β抗體 REG1 beta
脫氫酶13抗體 RDH13
環(huán)指蛋白75抗體 RNF75
環(huán)指蛋白160抗體 RNF160
RIT1蛋白抗體 RIT1
弗林蛋白酶(FUR)重組蛋白小鼠Crotonoside 巴豆苷1818-71-920mg
CPB 羧肽酶B1mg瓶
D(-)-Tartaric acid D-酒石酸147-71-720mg
PBR32220ug支
人外周血淋巴細胞分離液200ml瓶
HPD750大孔吸附樹脂500g瓶
Succunic Acide 琥珀酸110-15-620mg
尼氏染色液(焦油紫法)2×100ml瓶
10000×Solargel Red0.5ml支
1ml注射器 國產(chǎn)1支袋
羊抗雞IgG-HRP0.1ml支
Biodyne尼龍轉(zhuǎn)印B膜正電6,6 0.45um30cm×3m卷
Tween-20 吐溫-20500ml瓶